A kulturális médiumok elkészítése, melyet a célok és lépések alkotnak

az táptalajok előállítása Ez egy rutin módszer, amelyet laboratóriumokban használnak a kívánt mikroorganizmusok növekedéséhez. A tenyésztő táptalajok szilárd, folyékony vagy félig szilárd készítmények, amelyek a mikrobiális populáció kialakításához szükséges összes tápanyagot tartalmazzák.

Általánosságban elmondható, hogy a mikroorganizmusok termesztésének eszköze fehérjékben és aminosavakban gazdag, és általában olyan komponenst tartalmaznak, amely kedvez a tanulmányozni kívánt szervezet, például a vitaminok, a vér, a szérum növekedésének..

Nincs általános vagy univerzális tenyésztőközeg, mivel összetétele változik a kívánt mikroorganizmus szükségleteinek megfelelően. Egyes baktériumok bármely táptalajban fejlődhetnek ki, de másoknak speciális követelményei vannak.

index

• 1 Mit tartalmaz ez??
  • 1.1 Agar
  • 1.2 Folyadékok
  • 1.3 Kivonatok
  • 1.4 Peptonok
  • 1.5 Lengéscsillapítók
• 2 Célkitűzések
• 3 A média típusai
  • 3.1 Összetétele alapján
  • 3.2 A mikroorganizmus típusa alapján
• 4 lépés
• 5 Referenciák

Mit tartalmaz ez??

A mikroorganizmusok, például a gombák és a baktériumok apró mérete miatt nem vizsgálhatók egyedileg. Ezért azokat mesterséges eszközökkel kell termeszteni, amelyek lehetővé teszik a lakosság jelentős növekedését.

Például, ha baktériumokat akarunk tanulni, megfelelő feltételeket kell biztosítani számukra, hogy proliferálódhassanak és kolóniát képezzenek (amely szabad szemmel megfigyelhető).

A tenyésztőközeg előállítása nagymértékben változik, attól függően, hogy milyen típusú mikroorganizmusra van szükség. Előkészítése előtt meg kell ismerni a munkatest alapvető táplálkozási szükségleteit.

Ezután a tenyésztőközegekben használt leggyakoribb komponenseket ismertetjük, hogy általános elképzelésük legyen az előállításukról:

agar

A növényeket gélesítőszerként használják, és szilárd vagy félig szilárd táptalaj keresésekor adják hozzá. A táptalajok előállításához használt első szilárdítószer zselatin volt, de 1883-ban az agart W. Hesse vezette be a bakteriológia világába..

A bakteriológiai agar fő összetevője az algákból kivont összetett ágak poliszacharidja. Ezt a vegyületet a szokásos élelmiszerek, például fagylalt és dzsemek sűrítőanyagaként használják.

A mikrobiológia nagyon értékes eleme több okból is. Főleg azért, mert a mikroorganizmusok nem képesek lebontani, 100 ° C hőmérsékleten folyékonyak, és folyékony állapotban maradnak, amíg 45 ° C vagy ennél alacsonyabb értékre nem kerül..

Amennyiben szilárd táptalajt szeretne készíteni, az agar-koncentrációnak 1,5% körül kell lennie, míg a félszilárd anyagot 0,3-0,5% -ra kell előállítani.

folyadékok

A kórokozó szervezetek termesztése testfolyadékokat igényel, hogy fejlődhessenek, ahogy a természetes környezetükben is. Ezért egész vagy defibrillált vért adunk hozzá. A folyadékot egészséges állatból extraháljuk, és sterilizálás után a táptalajhoz adjuk.

részletek

Ezeket különböző állati részekből (például húsból vagy májból) vagy zöldségből (magokból) nyerjük, és feldolgozzuk, hogy szilárd koncentrátumot kapjunk paszta vagy por alakjában. A leggyakoribbak az élesztő, a maláta és a hús.

Peptonas

Ezeket a szerves vegyületeket állati vagy növényi szövetek enzimatikus vagy kémiai hidrolízisével állítjuk elő. A cél az aminosavakban gazdag tartalom hozzáadása, amelyek a fehérjék alapvető egységei.

Lengéscsillapítók

A pufferek vagy pufferrendszerek megakadályozzák a pH hirtelen változását, és segítenek fenntartani az optimális tartományt, amelyet a test tolerál.

A legtöbb organizmus 7-es pH-értéken megfelelően alakulhat ki, bár egyes baktériumok előnyben részesítik az alkáli közeget. Vannak azonban olyan baktériumok, amelyek ellenállnak a 6 és 9 értékek közötti pH-eltéréseknek.

A pH-ra érzékeny fajokban a károsodást nem a hidrogén- vagy hidroxil-ionok túlzott mennyisége okozza, hanem a gyenge savak vagy bázisok növekedése, amelyek behatolhatnak a sejtbe.

Ezenkívül hozzáadódik a pH monitorozására és az erjedés vagy más folyamatok által okozott eltérések elkerülésére szolgáló mutatók is.

célkitűzések

A táptalaj előkészítésekor a fő cél az, hogy az összes szükséges komponenst hozzáadjuk ahhoz, hogy lehetővé váljon az izolálni kívánt szervezet sikeres fejlődése. A kívánt tápközeg elérése érdekében az összetevők és a tápanyagok leghatékonyabb kombinációját kell azonosítani.

A közeg előkészítése és tárolása kritikus fontosságú a sikeres növekedés biztosításához, mivel ezek a lépések a környezet összetételétől és a tápanyagok rendelkezésre állásától függenek..

Figyelembe kell venni, hogy a mikroorganizmusok termesztése olyan feladat, amelyet számos, a tenyésztőközegen kívüli tényező befolyásol, mint például a kapott fény intenzitása, a hőmérséklet és a tápközeg lúgossága. Ezért mindegyik változót figyelembe kell venni.

A média típusai

Összetétele alapján

Összetételéből adódóan három fő növényfajta létezik: természetes vagy empirikus, félszintetikus és meghatározott szintetikus vagy kémiai eszközök.

Természetes környezet

Természetes környezetben a pontos összetétel ismeretlen. Ezek közé tartoznak az olyan összetevők, mint a tej, a hígított vér, a zöldséglevek, a kivonatok és a húsok és a peptidek infúziói. Gazdasági okokból gyakran alacsony költségű komponenseket adnak hozzá, mint a szójakivonat, a tejsavó, a melasz stb..

Félszintetikus közeg

Félszintetikus közegnek nevezzük, ha annak összetétele részben ismert. Az agart tartalmazó közeg félszintetikus közegvé válik.

Közülük többek között papa dextróz agar, czapek-dox agar, zab agar, peptonhús agar, többek között.

Szintetikus vagy vegyileg meghatározott közeg

Ebben az esetben a közeg összetétele - a szén, a nitrogén, a kén, a foszfor és a többi növekedési tényező forrása tekintetében - teljesen ismert. Nagyon hasznos, ha más kutatók számára reprodukálható eredményeket szeretne szerezni.

Az úgynevezett "speciális növekedési követelményekkel rendelkező" mikroorganizmusok esetében szükséges a szükséges komponensek hozzáadása. Ilyen például a Lactobacillus.

A mikroorganizmus típusa alapján

Hasonlóképpen, a tenyésztőközegek egy másik besorolása a benne növekedni képes mikroorganizmusok típusán alapul. Ezt az elvet követve rendelkezünk a következő általános gazdagítási, szelektív és differenciált eszközökkel. Mindegyiket az alábbiakban ismertetjük:

Általános eszközök

Ezek elismerik a mikroorganizmusok széles választékát. Ha bármely szervezetnek különleges feltételekre van szüksége a növekedéshez, akkor nem lesz képes sikeresen fejlődni az ilyen típusú növényekben.

A dúsítási eszközök

A dúsítás eszköze bizonyos mikroorganizmusok növekedését segíti elő, de semmilyen anyagot nem adtak hozzá, hogy megakadályozzák, hogy más típusú mikrobák növekedjenek benne..

Szelektív média

A mikroorganizmus sajátos növekedését keresik, többek között gombáknak, baktériumoknak, protozoonoknak nevezik. Ehhez gátolják mások fejlődését.

E cél elérése érdekében halálos kémiai vegyületeket adhatunk a mikroorganizmusok nagy csoportjához, és ártalmatlanok az érdeklődő szervezet számára, vagy olyan energiaforrásokat adhatunk hozzá, amelyeket csak a kért mikroba képes asszimilálni.

Szelektív táptalajt használnak, ha orvosi mintákat veszünk egy patogén mikroorganizmus termesztése érdekében. Itt szükséges a kórokozó növekedésének előmozdítása, és a normális mikrobiális flóra kialakulásának gátlása a betegből.

A bizmut-szulfit agar például nem teszi lehetővé a gram-pozitív baktériumok és a gasztrointesztinális üregben található baktériumok nagy számának növekedését. Ezért a tífusz-lázot okozó gram-negatív baktériumok tenyésztésére használják, Salmonella typhi székletmintákban.

Különböző média

Ez a típus az érdeklődésre számot tartó szervezet bizonyos diagnosztikai jellemzőit használja (például az anyagcsere sajátosságai), hogy képesek legyenek azonosítani őket egy másik, ugyanabban a környezetben növekvő fajral szemben..

Mind a különbözõ médiumok, mind a szelektív médiumok nagyon hasznosak a klinikai mikrobiológia és a közegészségügy területén, mivel ezeknek a tudományágaknak meg kell állapítaniuk a specifikus mikroorganizmusok jelenlétét a rossz higiéniai feltételekhez vagy feltételekhez kapcsolódóan..

A terményhez indikátor anyagokat adhatunk, amelyek megkülönböztető tulajdonságot adnak a kívánt kolóniának. Például az agar-eozin-metilén-kék (rövidített EMB) és a MacConkey-agar hozzáadódik laktózhoz és pH-indikátorhoz.

Így amikor ezekben a táptalajokban kolóniát alakítanak ki, amely képes laktózt erjeszteni és aldehideket termelni, különleges színben megfigyelhetőek.

lépések

Jelenleg a tenyésztőközeget liofilizált formában lehet megvásárolni. Ezért a készítményt megkönnyítik, és csak a terméket rehidratáljuk. A tartalmat meg kell mérni (figyelembe véve az előkészítendő végső mennyiséget) és desztillált vízben feloldva a termék összes jelzését követően..

A folyékony közeg tartalmát a kívánt tartályokba (Petri-csészék, csövek stb.) Kell osztani a későbbi sterilizáláshoz. A szilárd tápközeg eloszlásához mikrohullámú sütővel vagy vízfürdővel kell olvadni. A közeg pH-ját be kell állítani.

Az agart általában kémcsövekben vagy Petri-csészékben használják. Ha az agar ferde helyzetben megszilárdul, a megfelelő szöggel úgy, hogy a végső végső perem átlós legyen, ezt az elrendezést fuvola csúcsként vagy ferde csövekként ismerjük. Amikor az agar teljesen függőleges helyzetben megszilárdul, azt „mélynek” nevezzük..

A közeg sterilizálása után - autokláv segítségével - hagyjuk lehűlni. Ezeket mikroorganizmusoktól mentes környezetben kell kezelni, a leggyakoribb az, hogy egy világító öngyújtóval dolgozzon, amely biztosítja az aszeptikus környezetet a környéken..

referenciák

1. Celis, J. E. (2006). Sejtbiológia: laboratóriumi kézikönyv (2. kötet). Elsevier.
2. Finegold, S. M., Bailey, W.R., Baron, E. J., Fineglod, S.M., és Scott, E.G.. Bailey Scott: mikrobiológiai diagnózis. Pan American Medical.
3. Olivas, E. (2004). Mikrobiológia I. és II. Gyakorlat és parazitológia. Ciudad Juárez autonóm egyeteme.
4. Schlegel, H. G. és Zaborosch, C. (1993). Általános mikrobiológia. Cambridge University Press.
5. Tortora, G. J., Funke, B. R. és Case, C. L. (2007). Bevezetés a mikrobiológiába. Ed. Panamericana Medical.