Nefelometria abban, hogy mit és alkalmazásokat tartalmaz
az nephelometriával a részecskék által okozott sugárzás mérése (oldatban vagy szuszpenzióban), ezáltal mérve a szétszórt sugárzás teljesítményét a beeső sugárzás irányától eltérő szögben.
Amikor a szuszpenzióban lévő részecske fénysugárral ér, a fény egy része tükröződik, egy másik rész felszívódik, egy másik rész átirányul, és a többit továbbítják. Ezért, amikor a fény átlátszó közegre tör, amelyben szilárd részecskék szuszpenziója van, a szuszpenziót zavarosnak találjuk.
index
- 1 Mi a nefelometria??
- 1.1 A sugárzás diszperziója az oldatban lévő részecskékkel
- 1.2. Nefelométer
- 1.3 Eltérések
- 1.4 Metrológiai jellemzők
- 2 Alkalmazások
- 2.1 Immunkomplexek kimutatása
- 2.2 Egyéb alkalmazások
- 3 Referenciák
Mi a nefelometria??
A sugárzás diszperziója az oldatban lévő részecskékkel
Abban a pillanatban, amikor a fénysugár eléri a szuszpenzióban lévő anyag részecskéit, a gerenda terjedésének iránya megváltoztatja irányát. Ez a hatás a következő szempontoktól függ:
1.A részecske méretei (méret és alak).
2. A szuszpenzió jellemzői (koncentráció).
3. A fény hullámhossza és intenzitása.
4. A beeső fény távolsága.
5. Felismerési szög.
6. A közeg törésmutatója.
nephelometer
A nefelelométer olyan eszköz, amelyet folyékony mintában vagy gázban szuszpendált részecskék mérésére használnak. Tehát a fényforráshoz képest 90 ° -os szögben elhelyezett fénysorompó érzékeli a szuszpenzióban jelen lévő részecskék sugárzását.
Továbbá a részecskék által a fotocella felé visszavert fény függ a részecskék sűrűségétől. Az 1. ábra bemutatja a nefelelométer alkotóelemeit:
A. Sugárforrás
A nefelometriában létfontosságú, hogy nagy fénykibocsátású sugárforrás legyen. Különböző típusok, többek között a xenon lámpák és a higanygőz lámpák, a volfrám halogén lámpák, a lézersugárzás, többek között.
B. Monokromátor rendszer
Ez a rendszer a sugárforrás és a küvetta között helyezkedik el, így elkerülhető a különböző hullámhosszú sugárzás küvettáján a kívánt sugárzáshoz viszonyítva..
Ellenkező esetben a fluoreszcens reakciók vagy a hevítő hatások az oldatban eltéréseket okozhatnak a méréstől.
C. Olvasó küvetta
Ez általában prizmatikus vagy hengeres tartály, és különböző méretű lehet. Ebben az egyik a megoldás a tanulmányban.
D. detektor
Az érzékelő egy meghatározott távolságban helyezkedik el (általában nagyon közel van a tartályhoz), és felelős a szuszpenzió részecskéi által szétszóródott sugárzás kimutatásáért..
E. Olvasási rendszer
Általában ez egy elektronikus gép, amely adatokat fogad, átalakít és feldolgoz, ami ebben az esetben az elvégzett vizsgálatból kapott mérések.
eltérések
Minden mérés egy bizonyos százalékos hiba függvénye, melyet főként a következők adnak:
Szennyezett vödör: a küvettákban bármely, a vizsgálati oldaton kívüli anyag, amely a küvettában vagy kívül van, csökkenti a sugárzó fényt az érzékelő útján (hibás küvetták, a küvetta falához tapadó por).
interferenciák: a mikrobiális szennyeződések vagy zavarosságok jelenléte diszpergálja a sugárzó energiát, növelve a diszperzió intenzitását.
Fluoreszcens vegyületek: ezek olyan vegyületek, amelyek az incidens sugárzás által gerjesztett hibás és nagy mértékű diszperziós sűrűséget okoznak.
A reagensek védelme: a rendszer nem megfelelő hőmérséklete kedvezőtlen körülményeket okozhat a vizsgálatnak, és ösztönözheti a zavaros reagensek vagy csapadékok jelenlétét..
Az elektromos áram ingadozása: annak elkerülése érdekében, hogy a beeső sugárzás hibaforrás legyen, az egyenletes sugárzáshoz feszültség stabilizátorokat ajánlunk.
Metrológiai jellemzők
Mivel a detektált sugárzás sugárzó teljesítménye közvetlenül arányos a részecskék tömegkoncentrációjával, a nefelometrikus vizsgálatok elméletileg magasabb metrológiai érzékenységet mutatnak, mint más hasonló módszerek (például turbidimetria).
Ezenkívül ez a technika hígított oldatokat igényel. Ez lehetővé teszi mind az abszorpciós, mind a reflexiós jelenségek minimalizálását.
alkalmazások
A nefelometriás vizsgálatok nagyon fontos szerepet töltenek be a klinikai laboratóriumokban. Az alkalmazások az akut fázis, a komplement és a koaguláció immunoglobulinjainak és fehérjéinek meghatározásától függenek.
Az immunkomplexek kimutatása
Ha egy biológiai minta egy érdekes antigént tartalmaz, egy (pufferoldatban) egy antitesttel keverjük össze, hogy egy immunkomplexet képezzenek.
A nehelometria az antigén-antitest-reakció (Ag-Ac) által szétszóródott fény mennyiségét méri, és ily módon az immunkomplexek kimutathatók.
Ezt a vizsgálatot két módszerrel lehet elvégezni:
A végpont pontja:
Ezt a technikát alkalmazhatjuk a végpont elemzésére, amelyben a vizsgált biológiai minta antitestjét huszonnégy órán át inkubáljuk..
Az Ag-Ac komplexet nefelométerrel mérjük, és a szétszórt fény mennyiségét összehasonlítjuk a komplex kialakulása előtt elvégzett azonos méréssel..
Kinetikus nefelometria
Ebben a módszerben folyamatosan figyeljük a komplexképződés sebességét. A reakció sebessége a mintában lévő antigén koncentrációjától függ. Itt a mérés az idő függvényében történik, így az első mérés a "nulla" (t = 0) időpontban történik..
A kinetikus nefelometria a legelterjedtebb módszer, mivel a vizsgálatot 1 óra múlva lehet elvégezni a végpont módszer hosszú időtartamához képest. A diszperziós arányt a reagens hozzáadása után mérjük.
Ezért, amíg a reagens állandó, a jelenlévő antigén mennyisége közvetlenül arányos a változás sebességével.
Egyéb alkalmazások
A nefelometriát általában a víz kémiai minőségének elemzésében, a tisztaság meghatározásában és a kezelés folyamatainak szabályozásában használják.
Azt is használják a levegőszennyezés mérésére, amelyben a részecskék koncentrációját az általuk előállított diszperzió alapján határozzák meg..
referenciák
- Britannica, E. (s.f.). Nefelometria és turbidimetria. A britannica.com-ból visszanyert
- Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetria és nefelometria. Letöltött pdfs.semanticscholar.org
- Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). A technochemical.com webhelyről beszerezhető
- Morais, I. V. (2006). Turbidimetriás és nefelometrikus áramláselemzés. A repositorio.ucp.p
- Sasson, S. (2014). A nefelometria és a turbidimetria elvei. A notesonimmunology.files.wordpress.com oldalon található
- Stanley, J. (2002). Az immunológia és a szerológia alapjai. Albany, NY: Thompson Learning. A következőt kapta: books.google.co.ve
- Wikipedia. (N.d.). Nefelometria (gyógyszer). A (z) en.wikipedia.org webhelyről származik