Baird Parker Agar alapítvány, előkészítés és felhasználás

az Baird Parker agar szilárd, szelektív és differenciált táptalaj. 1962-ben jött létre a pozitív Staphylococcus-számlálás kimutatására és koagulázására (Staphylococcus aureus).

Ez a kazein hasnyálmirigy-hidrolizátum, húskivonat, élesztőkivonat, lítium-klorid, glicin, nátrium-piruvát, kálium-tellurit, agar és tojássárgája-emulzió..

A Baird Parker-agar az S. aureus a tellurit redukálása és lecitináz előállítása. Mindkét tulajdonság egy olyan kolóniát hoz létre, amelynek sajátos jellemzői vannak e fajra. Ezért nagy hatékonyságot nyújt a mikroorganizmus kimutatásában.

A. \ T S. aureus fekete vagy sötétszürke, színtelen szegéllyel és egy tiszta halóval körülvéve, megkülönböztetve magát a többi mikroorganizmustól. Ez a kórokozó megtalálható a klinikai mintákban, vizekben, kozmetikumokban és nyers vagy főtt élelmiszerekben.

A diagnózisa vagy kimutatása nagyon fontos, mivel sokféle patológiát termel, mint pl. Az ételmérgezés, az égetett bőr szindróma, a mérgező sokk szindróma, a tályogok, a meningitis, a septicemia, az endocarditis..

index

• 1 Alapítvány
  • 1.1 Táplálkozási teljesítmény
  • 1.2 Szelektív
  • 1.3
• 2 Előkészítés
  • 2.1 Tojássárgája emulzió
  • 2.2 Kálium-tellurit 1 tömeg / térfogat%
  • 2.3 A tenyésztőközeg előállítása
• 3 Használja
  • 3.1 Klinikai minták
  • 3.2 Élelmiszerminták
  • 3.3 Vízminta
• 4 Minőségellenőrzés
• 5 Ajánlások
• 6 Referenciák

alapítvány

Tápláló hatalom

A kazein hasnyálmirigy-hidrolizátum, a húskivonat és az élesztőkivonat az általános mikrobiális fejlődéshez szükséges tápanyagok, vitaminok és ásványi anyagok forrása, míg a piruvát és a glicin olyan vegyületek, amelyek kedveznek a specifikus növekedésnek. Staphylococcus aureus.

szelektív

A Baird Parker agar szelektív, mert olyan anyagokat tartalmaz, amelyek gátolják a kísérő növényvilág növekedését, miközben elősegítik a növények fejlődését. S. aureus. A gátló vegyületek a lítium-klorid és a kálium-tellurit.

differenciális

Ez azt jelenti, hogy lehetővé teszi a S. aureus a többi koaguláz-negatív staphylococcusból. S. aureus képes arra, hogy a telluritot fekete fémes szabad telluriumra redukálja, ami fekete vagy sötét szürke telepeket képez.

Hasonlóképpen, a tojássárgája biztosítja a szubsztrátok számára a lecitináz és lipáz enzim jelenlétének bizonyítását. S. aureus pozitív lecitináz, és ezért tiszta kolónia figyelhető meg a kolónia körül, jelezve, hogy a lecitin hidrolizálódik.

Ebben az értelemben a fekete vagy sötét szürke kolóniák jelenléte fényes, halogénnel körülvett telepek jelenlétét jelzi S. aureus. 

Ha kicsapódási zóna alakul ki, azt jelzi, hogy lipáz aktivitás van. Néhány törzs S. aureus pozitív lipáz és más negatív.

Abban az esetben, ha a S. aureus Ha a lipáz pozitív, akkor a fekete vagy sötét szürke kolónia körül átlátszatlan zóna figyelhető meg, majd a lecitináz hatására a tiszta halo..

A baktériumok más kolóniái S. aureus ebben a táptalajban növekszik, színtelen vagy barna kolóniákat alakít ki, halo nélkül.

Az atípusos fekete kolóniák színtelen szegéllyel vagy anélkül is megfigyelhetők, de tiszta halo nélkül. Ezeket a telepeket nem szabad figyelembe venni, nem felelnek meg S. aureus.

előkészítés

Tojássárgája emulzió

Vegyünk egy friss csirke tojást, mossuk le és helyezzük 2-3 órát 70% -os alkohollal. Ezután a tojás aszeptikusan megnyílik, és a tojásfehérjét óvatosan elválasztják a sárgától. Ezután 50 ml tojássárgáját veszünk, és 50 ml steril fiziológiai oldattal keverjük össze.

Kálium-tellurit 1 tömeg / térfogat%

Egyes kereskedelmi házak 1% -os kálium-telluritot értékesítenek. Ezt a közeget a közeg megszilárdulása előtt adjuk hozzá.

Ennek az oldatnak a laboratóriumban történő elkészítéséhez 1,0 g kálium-telluritot kell feloldani és vízben feloldani. Ezt követően a víz mennyisége 100 ml-re áll. Az oldatot szűrési módszerrel kell sterilizálni.

Tápközeg előállítása

Mérjünk be 60 g dehidratált táptalajt és oldjunk fel 940 ml desztillált vízben. Hagyjuk a keveréket kb. 5-10 percig pihenni.

Az oldódási folyamat javítása érdekében a tápközeget gyakran keverjük fel a hő keverésével. Hagyjuk forralni egy percig. Sterilizáljuk az autoklávban 121 ° C-on 15 percig.

Hagyjuk állni, amíg el nem éri a 45 ° C-ot, és adjunk hozzá 50 ml tojássárgája-emulziót és 10 ml 1% -os telluritot. Keverjük össze jól, és steril petri-csészékre 15-20 ml-t tálaljunk.

Hagyja megszilárdulni, megfordítani a foltokban és tárolásig hűtőszekrényben tárolja.

Az elkészített közeg végső pH-jának 6,8 ± 0,2 értéknek kell lennie.

A minta telepítése előtt várjon, amíg a lemez a környezeti hőmérsékletet veszi. A lemezeket véséssel, vagy a felszínen vetve Drigalski spatulával vetjük el.

A dehidratált közeg színe világosbarna és az elkészített közeg színe világos borostyán.

használat

Klinikai minták

A klinikai mintákat közvetlenül az anyag egy részének a lemez egyik végéből való kisülése útján vetik be, és onnan kimerülnek. Inkubáljuk 24-48 órán át 35-37 ° C-on.

Élelmiszerminták

Mérjünk 10 g élelmiszermintát, és 90 ml 0,1% -os peptonozott vízben homogenizáljuk, szükség esetén hígításokat készítünk. A lemezeket háromszorosra beoltjuk 0,3 ml elkészített oldatokkal, és vetjük fel a felületre egy Drigalski spatulával. Inkubáljuk 24-48 órán át 35-37 ° C-on.

Ez a módszertan lehetővé teszi, hogy számítsuk ki a kapott tipikus kolóniákat, és ideális, ha jelen van S. aureus 10 CFU / g / ml minta felett.

Ha gyanítja, hogy az összeg S. aureus kicsi, vagy rengeteg kísérő növény, javasoljuk, hogy a mintát tripticase szójalevélben 10% -os nátrium-kloriddal és 1% -os nátrium-piruváttal gazdagítsák. Ez kedvez a növekedésnek S. aureus és gátolja a kísérő növényvilág fejlődését. A Baird Parker agarra felhős csövek kerülnek be.

Vízminták

Vákuumszűrő rendszerben és sterilizálva 100 ml vizet szűrünk, majd a 0,4 mikronos mikropórusos membránt steril bilincs segítségével eltávolítjuk és Baird Parker lemezre helyezzük. Inkubáljuk 24-48 órán át 35-37 ° C-on. Ez a technika lehetővé teszi a tipikus kolóniák számolását S. aureus.

Minőségellenőrzés

A Baird Parker agar minőségének értékeléséhez ismert törzseket használhatunk, például Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 vagy Proteus mirabilis ATCC 43071.

A törzsek esetében. \ T S. aureus Ismert, hogy az ATCC csökkenti a telluritot, és pozitív lipáz és lecitináz. Ezért kellően fejlettnek kell lennie, és konvex telepeket kell termesztenie fekete középponttal és színtelen éllel, átlátszatlan halóval és egy másik, külső tisztaságú halóval..

Másrészt, S. epidermidis ebben a tápközegben gyenge fejlődés várható, szürkés-barna-fekete kolóniákkal, nincs tiszta halo.

hogy E. coli és P. mirabilis várhatóan teljesen vagy részben gátolódik. Növekedés esetén barna kolóniák alakulnak ki átlátszatlan zóna nélkül, illetve tiszta halo nélkül.

ajánlások

-A táptalajt nem szabad a tellurit és a tojássárgája után melegíteni.

-A tojássárgája-emulzió előállítása és a közegben való hozzáadása nagyon szennyezett lépés. Nagyon óvatosan kell eljárni.

-Ha léteznek tipikus kolóniák S. aureus meg kell erősíteni a koaguláz tesztet az említett törzsbe.

-Ha kétséges eredmények merülnek fel a koagulázzal, más megerősítő vizsgálatokat kell végezni.

-Ügyeljen arra, hogy ne keverje össze a tipikus kolóniák jelenlétét S. aureus a fekete színű atipikus kolóniákkal.

referenciák

1. Wikipédia közreműködők. Baird-Parker agar. Wikipédia, The Free Encyclopedia. 2017. március 15., 19:36 UTC. Elérhető: wikipedia.org/ Hozzáférés 2019. február 18-ig.
2. BD laboratóriumok. Baird Parker Agar. 2006. Elérhető: bd.com
3. Laboratóriumok Britania. Baird Parker agar alapja. 2015-ben elérhető: britanialab.com
4. Francisco Soria Melguizo Laboratories. 2009. Baird Parker Agar. Elérhető a következő címen: http://f-soria.es/Inform
5. Laboratóriumok Britania. Kálium-tellurit. 2015-ben elérhető: britanialab.com
6. Alarcón-Lavín M, Oyarzo C, Escudero C, Cerda-Leal F, Valenzuela F. Carrying Staphylococcus aureus A típusú enterotoxigén típusú, az orrnyálkahártya-kenetben \ t. Rev Med Chile 2017; 145, 1559-1564
7. Venezuelai szabvány Covenin 1292-89. (1989). Food. Szigetelés és számlálás Staphylococcus aureus. Elérhető:sencamer.gob.ve