Agar BHI alapozás, előkészítés és felhasználás



az BHI agar vagy Brain Heart infúziós agar egy tápláló szilárd táptalaj. Spanyolul az agy szív infúziós agaraként említjük. Ez egy nem szelektív tenyésztő tápközeg, ami azt jelenti, hogy a Gram-pozitív és a Gram-negatív baktériumok minden típusa, valamint néhány élesztő- és fonalasgomba is kialakítható..

Borjú agy és szívinfúzió, állati szövetek peptikus hidrolizálása, kazein hasnyálmirigy-hidrolizátum, nátrium-klorid, glükóz, dinátrium-foszfát és agar..

Meg kell jegyezni, hogy a BHI agar a bakteriológiai laboratóriumok egyik leggyakoribb tenyésztőközege. Használható kiegészítők nélkül, mint elsődleges tenyészet, más szelektív táptalajban nyert telepek szubkultúrája vagy a laboratóriumi törzsek fenntartása..

Másrészt ideális táptalaj, amelyet alapként használhatunk dúsított közegek, például vér agar és csokoládé-agar előállítására. Mindkettő ideális az igényes mikroorganizmusok táplálkozási szempontból történő izolálására. Figyelembe kell azonban venni, hogy mivel glükózt tartalmaz, nem megfelelő a hemolízis mintáinak megfigyelése.

Hasonlóképpen, a BHI agar használható a kórokozó mikroorganizmusok nehéz táptalajban történő izolálására szolgáló speciális eszközök előállítására, köztük: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae és Histoplasma capsulatum.

Az antibiotikum adalékanyaggal BHI agar válik szelektív táptalajra a gombák izolálására.

index

  • 1 Alapítvány
  • 2 Előkészítés
    • 2.1 Övek
    • 2.2 Lemezek
    • 2.3 A vér agar előállítása
  • 3 Használat
    • 3.1 Használat kiegészítők nélkül
    • 3.2 Alapanyagként más táptalajok előállítására
  • 4 Minőségellenőrzés
  • 5 Referenciák

alapítvány

Tápláló tápközeg a mérsékelten igényes mikroorganizmusok izolálásához, a vér és más táplálékkiegészítők hozzáadásával növelve annak gazdagodását.

Ez egy nem szelektív tenyésztő tápközeg, ezért lehetővé teszi a legtöbb Gram-pozitív és Gram-negatív baktérium, valamint egyes gombák növekedését. Az antibiotikumok hozzáadásával azonban szelektív lehet.

A tápközeg borjú agy és a szív, az állati szövetekből származó peptid-hidrolizátum és a kazein hasnyálmirigy-hidrolizátum infúzióját tartalmazza; mindezek a vegyületek vitaminok, aminosavak, nitrogén és szénforrásként szolgálnak.

A glükóz olyan szénhidrát, amely energiát biztosít a mikroorganizmusoknak, miután fermentálták. Míg a nátrium-klorid és a dinátrium-foszfát fenntartja az ozmotikus egyensúlyt, és pH-t közelít a semlegességhez. Végül az agar szilárd anyagot ad a közegnek.

előkészítés

Mérjünk le 52 gramm dehidratált közeget és oldjunk fel egy liter desztillált vízben. A keveréket hőforrásig hozzuk, amíg fel nem forad, és az oldódási folyamat során gyakran keveredik.

A BHI agar ékeket vagy lemezeket adalékanyag nélkül készíthet.

ékek

Az ékek elkészítéséhez a készítményt addig töltjük, amíg az egyes csövek felét nem töltjük, majd autoklávban 121 ° C-on 15 percen át sterilizálják, amikor a talajon fekszik, amíg megszilárdulnak. Ezután hűtőszekrényben tárolja a felhasználásig.

lemezek

Az oldott keveréket 121 ° C-on 15 percig autoklávozzuk, amikor hagyjuk, hogy hagyjuk lehűlni 50 ° C-ra, és 20 ml táptalajt steril Petri-csészékben szolgáltatunk. Hagyjuk megszilárdulni, invertálni és hűtőszekrényben tárolni, amíg fel nem használják. Az ültetés előtt hagyjuk, hogy a lemezek szobahőmérsékletet vegyenek.

A közeg pH-ja 7,4 ± 0,2 legyen.

A nem előkészített közeg bézs színű és világos borostyánszínű.

Vér agar készítése

A tápközeg sterilizálása után körülbelül 45-50 ° C hőmérsékletre hűtsük, ekkor hozzáadjuk a vért (50 ml), óvatosan keverjük és homogenizáljuk, és aszeptikusan 20 ml-t adunk minden Petri-csészébe. Ha a lemezen buborékok képződnek, az égő lángját gyorsan el kell távolítani a buborékok felett, hogy megszüntesse őket.

Hasonlóképpen, speciális közegeket állíthatunk elő úgy, hogy hozzáadjuk a megfelelő adalékanyagokat, amikor a keverék eléri a 45-50 ° C hőmérsékletet.

A közeg cseresznye piros.

alkalmazások

Használja kiegészítők nélkül

Az adalékanyag nélküli BHI-agar primer tenyészetként és tiszta mikroorganizmus-törzsek beültetésére használható, amelyek közepes vagy közepesen igényesek a későbbi azonosításhoz..

Mivel ez egy világos színű közeg, ideális a pigmentek megfigyelésére, és azért is, mert nem tartalmaz zavaró anyagokat, felhasználható biokémiai vizsgálatok elvégzésére, mint például az oxidáz és a kataláz, vagy más biokémiai vizsgálatok felszerelésére az ebből származó telepekből. agar.

Hasonlóképpen, a BHI agar ékeket széles körben használják a törzsek tartós tartására a laboratóriumban meghatározott ideig (bakterioteca).

A felületre baktériumtörzsekkel beültetett lemezeket vagy ékeket 37 ° C-on inkubáljuk 24-48 órán át. Míg a gombákban a hőmérséklet és az inkubációs idő függ a keresett gomba típusától.

Alapanyagként más táptalajok előállítására

Ezzel a bázissal gazdagított és szelektív táptalajt lehet előállítani.

dúsított

Fő feladata, hogy alapul szolgáljon a vér agar előállításához a mikrobiológiai laboratóriumokban történő rutinszerű alkalmazáshoz. Különösen, a BHI bázis elősegíti a törzsek izolálását Streptococcus sp. Ennek azonban az a hátránya, hogy nem alkalmas a hemolízis minták megfigyelésére, mert glükózt tartalmaz.

Azt is használják nyúl vagy ló vér agar előállítására, hogy izolálják Haemophilus sp. A jobb eredmények érdekében hozzáadhat egy gazdagító kiegészítést (IsoVitaleX).

Ha a minták a légutakból az agarra érkeznek, a bacitracin hozzáadható a kísérő növényvilág gátlásához, és növelheti a törzsek helyreállítási valószínűségét. Haemophilus sp.

Másrészt a vér agar (bárány vagy ember) előállítható tellurit cisztinnel izolálás céljából Corynebacterium diphtheriae. Hasonlóképpen hasznos nyúl-vér-agar előállítása cisztin és glükóz hozzáadásával az izoláláshoz. Francisella tularensis.

A vér-agar lemezek vetését kimerüléssel végezzük, és 35-37 ° C-on inkubáljuk 24-48 órán át mikroaerofilben (5-10% CO).2).

szelektív

Ez a tápközeg antibiotikumok hozzáadásával helyettesítheti a Sabouraud agart a gombák izolálására.

A BHI agar és a kloramfenikol - gentamicin vagy a penicillin, a streptomicin és a ló vér kombinációja ideális Histoplasma capsulatum.

Az elkülöníthető mikroorganizmustól függően 35-37 ° C-on vagy szobahőmérsékleten aerobiosisban történő inkubálás javasolt. Előfordulhat, hogy mindkét hőmérséklet-tartományban inkubálásra van szükség, 2 lemez használatával.

Néhány gombának tetszik Trichophyton mentagrophytes ezeket 7 napig szobahőmérsékleten kell inkubálni.

Minőségellenőrzés

Minden egyes előkészített tételből ajánlott 1 lemez vagy ék inkubálása 37 ° C-on 24 órán át, és ellenőrizze, hogy nincs-e növekedés; Különösen fontos a vér agar előkészítése, mert könnyen szennyezett közeg.

Másrészt a közeg minőségét ismert vagy tanúsított standard törzsek beoltásával és azok fejlődésének megfigyelésével lehet értékelni.

Ebben az értelemben az adalékanyagok nélküli BHI agar kiértékelése Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 vagy Candida albicans Az ATCC 10231-et 37 ° C-on aerobiosisban inkubáljuk 24-48 órán át. Minden esetben kielégítő növekedés várható.

A vér agar lemezek, a törzsek értékelése  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 vagy Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

A baktériumtörzseket 37 ° C-on inkubáljuk microaerophilicusban 24 órán át, míg a gomba szobahőmérsékleten nedves kamrában inkubáljuk legfeljebb 7 napig. Minden esetben kielégítő növekedés várható.

referenciák

  1. Laboratóriumok Britania. Brain Heart infúzió Agar. 2015-ben elérhető: britanialab.com.
  2. BD laboratóriumok Agyi szívinfúzió (BHI) agar. 2013. Elérhető: bd.com.
  3. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories, S.A. Agy szív infúziós agar. 2009.
  4. Neogén laboratórium. Agy szív infúziós agar. Elérhető: foodsafety.neogen.com
  5. Gil M. Agar vér: alapítás, felhasználás és előkészítés. 2018. Rendelkezésre áll: lifeder.com.
  6. Wikipédia közreműködők. Agyi szív infúzió Wikipédia, The Free Encyclopedia. 2018. szeptember 19., 03:58 UTC. Elérhető: wikipedia.org. Hozzáférés 2019. március 2-ig.
  7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztői Panamericana S.A. Argentína.