Selenite húsleves alapozás, előkészítés és felhasználás

az szelénleves Szelektív folyékony tápközeg. Leifson tervezte a minták dúsítására, ahol gyanúja van a Salmonella nemzetségbe tartozó enteropatogén baktériumok jelenlétének..

Ez a közeg megfelel az Amerikai Közegészségügyi Egyesület (APHA) követelményeinek, és ezért elfogadható a szalmonella jelenlétének vizsgálatára, többek között a székletmintákban, vizeletben, folyékony vagy szilárd élelmiszerekben, vízben..

A kémiai összetétele kedvezően hat a mikroorganizmusok helyreállítására, másrészt gátolja mások növekedését. Elsősorban mérgező az Enterobacteriaceae családba tartozó legtöbb baktériumra. Ugyanakkor lehetővé teszi a Shigella törzsek visszanyerését, és nem gátolja a Pseudomonas és a Proteus növekedését..

Vízmentes nátrium-hidrogén-szelenitből, vízmentes nátrium-foszfátból, peptonokból és laktózból áll. Van még egy variáns, amelyhez cisztint adunk, így a szelén-cisztin-leves neve.

Jelenleg a szelenit-cisztin-tápközeg alkalmazása előnyös, mivel nagyobb Salmonella-kinyerési százalékot kapunk, amely megegyezik a más szelektív tápközegekkel azonos céllal, például Tetrathionát-nátrium-táptalajjal..

index

• 1 Alapítvány
• 2 Előkészítés
  • 2.1 - Selena
  • 2.2. A kereskedelmi közeg előállítása
  • 2.3. Szelén-cisztin variáns
• 3 Használat
• 4 Tömörített
• 5 Minőségellenőrzés
• 6 Korlátozások
• 7 Referenciák

alapítvány

A táptalajban lévő peptonok tápanyagként szolgálnak a mikroorganizmusok megfelelő fejlődéséhez. A szalmonella törzsek nitrogén, vitaminok és aminosavak forrásaként peptonokat használnak.

A laktóz a fermentálható szénhidrát, míg a nátrium-szelenit gátló anyag, amely lassítja a Gram-pozitív baktériumok és a bélflórában jelenlévő legtöbb baktérium növekedését, különösen az Enterobacteriaceae családban. A nátrium-foszfát a puffer, amely stabilizálja a közeg pH-ját.

Az L-cisztint tartalmazó szelenitleves variáns esetében ez a további vegyület redukálószer, amely minimálisra csökkenti a szelenit toxicitását, növelve a Salmonella gyógyulását..

előkészítés

-Selenite húsleves

Ha van a keverék összetevője, mérje meg:

4 g vízmentes nátrium-hidrogén-szelenit.

10 g vízmentes nátrium-foszfátot.

5 g pepton.

4 g laktózt.

A vegyületeket 1 liter steril desztillált vízben oldjuk. Kicsit fel lehet melegíteni, hogy teljesen feloldódjon.

Egyes laboratóriumok 10 percig folyékony gőzzel tessék ki a táptalajt, hogy sterilizálják, mivel az autoklávot nem szabad használni. Ha a táptalajt sterilizálják, akkor a hűtőszekrényben tárolható, amíg fel nem használják.

Sterilizálás nélkül is előállítható, és közvetlenül a steril vizsgálati csövekhez 10-15 ml-t adagolunk.

Ebben az esetben hagyja pihenni és azonnal használni. Mivel a közeg nem steril, nem lehet hűtőszekrényben tárolni későbbi használatra.

-A kereskedelmi közeg előállítása

Ha a kereskedelmi közeg rendelkezésre áll, 23 g dehidratált tápközeget lemérünk és egy liter steril desztillált vízben oldunk. A feloldás befejezéséhez röviden melegítsen. Ne sterilizáljon autoklávban. Az aszeptikusan 10 vagy 15 ml-t steril vizsgálati csövekben tálaljuk.

A közeg végső pH-ja 7,0 ± 0,2 legyen.

Meg kell jegyezni, hogy a dehidratált közeg színe bézs, és a készítmény tiszta és áttetsző borostyánszínű.

Változat-szelenit-cisztin-leves

Ugyanazokat a vegyületeket tartalmazza, mint a szelitit, de 10 mg cisztint adunk hozzá. Az eljárás további része pontosan megegyezik a fent leírtakkal.

alkalmazások

Ez a táptalaj különleges, hogy epidemiológiai vizsgálatokban alkalmazzuk, olyan esetekben, amikor a betegség nem az akut stádiumában van, tünetmentes betegek vagy egészséges hordozók..

A Salmonella nemzetség izolálása általában nehéz, mivel általában úgy találják, hogy szűkös módon szennyezik a mintákat. A kis mennyiségben való jelenlét könnyen átfedhető más, nagyobb mennyiségben talált baktérium-nemzetek növekedésével.

Másrészt a feldolgozott élelmiszerek feldolgozására használt nyersanyagot gyakran hővel, dehidratálási folyamatokkal, fertőtlenítőszerek, sugárzás és tartósítószerek használatával érintik..

Ezért a nyersanyagban jelenlévő Salmonellákat rosszul kezelik a terméknek a fent említett ipari folyamatokhoz történő benyújtása. Hasonlóképpen, olyan klinikai minták esetében, mint a széklet, a törzsek gyengék lehetnek, ha azok antibiotikumokkal kezelt betegekből származnak..

Ezért minden olyan mintát, amelyben feltételezhető, hogy a Salmonella jelenléte gyanúja van, laktóz-táptalajban kell előzetesen dúsítani, majd szelén-táptalajjal dúsítani, hogy a szelektív táptalajban, például SS-agarban, xilóz agarban, lizin-dezoxikolátban (XLD) optimalizálható ), többek között az enterális Hektoen agar (HE) és a zöldfényes agar.

beültetett

A székletmintákhoz 1 g mintát kell venni, és szuszpendálni egy 10–15 ml szelén-tápközeggel ellátott csőbe. Ha a széklet folyadék, vegye be 1 ml-t, és hagyja fel a tápközegben. A rektális tamponok esetében ürítse ki a tamponanyagot a táptalajba.

A szilárd élelmiszerek mintáiban 1 gr-ot és a szelénlevesben szuszpendálunk.

A folyékony élelmiszerekben egyenlő részekben keverjük össze a szelenit táptalajt kétszeres koncentrációban.

A vizeletminták centrifugálásához dobja ki a felülúszót, vegye le az összes üledéket, és szuszpendálja azt a szelenitlevesbe.

A táptalajokat 37 ° C-on inkubáljuk 24 órán keresztül. A bakteriális növekedést zavarosság bizonyítja. Egy 42 ° C-on történő inkubáláshoz mintánként egy további csövet is tartalmazhat. Ezt követően szelektív szilárd táptalajt vetünk a szelitból készült húslevestől.

Minőségellenőrzés

A sterilitás szabályozásához az egyes tenyészetekből származó beoltás nélküli szelenit-táptalajt 37 ° C-on inkubáljuk 24 órán át. Várható, hogy nincs zavarosság vagy a közeg színének változása.

A közeg jó működésének ellenőrzése céljából ismert törzsek alkalmazhatók, például:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 és Proteus mirabilis ATCC 43071.

A várt eredmények:

• Az első három baktériumtörzs esetében a növekedésnek kielégítőnek kell lennie.
• hogy Escherichia coli részleges gátlás.
• A Proteus mérsékelt növekedése.

korlátozások

A közepes selenit leves mérgező az emberi bőrre, ezért kerülni kell a közvetlen érintkezést.

referenciák

1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. A nátrium-szelenit és a nátrium-tetrationát táptalajainak összehasonlítása, mindkettő 37 ° C-on és 42 ° C-on inkubálva elszigeteltsége Salmonella széklet hordozók széklet. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
2. Laboratóriumok Britania. Selenito Caldo. 2015-ben elérhető: britanialab.com
3. Neogen Laboratories Selenito húsleves Elérhető: foodsafety.neogen.com
4. González-Pedraza J, Pereira -Sandandres N, Soto -Valela Z, Hernández-Aguirre E, Villarreal-Camacho J. Salmonella spp. és molekuláris eszközöket annak kimutatására. Egészségügy, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Elérhető: http://www.scielo.org.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztői Panamericana S.A. Argentína.