Szójaleves tripticaseína alapítvány, előkészítés és felhasználás

az szója húsleves tripticaseína Ez egy folyékony táptalaj, nagyon tápláló és nem szelektív. Nagyfokú sokoldalúsága miatt a mikrobiológiai laboratóriumban az egyik legszélesebb körben használt folyékony táptalaj.

Az is ismert, mint húsleves tripticasa szója vagy emésztett kazein-szója, akinek rövidítése angol nyelvű rövidítése TSB. Tryptic vagyok Broth vagy CST a rövidítése spanyolul. Alkalmazásuk összetétele miatt nagyon változatos. Tripteint, szója peptont, nátrium-kloridot, dikálium-foszfátot és glükózt tartalmaz.

Képes reprodukálni klinikailag fontos patogén baktériumokat, beleértve azokat is, amelyek táplálkozási szempontból igényes és anaerob baktériumok. Néhány opportunista gomba és szennyeződés is kialakulhat ebben a környezetben.

Magas táplálkozási teljesítménye miatt nagy érzékenységgel rendelkezik a mikrobiális szennyeződések észlelésére, ezért az USDA Állat- és Növény-egészségügyi Ellenőrző Szolgálata választotta ki a vakcinák mikrobiológiai vizsgálatára..

Hasonlóképpen, a tripticase szója leves megfelel a különböző gyógyszerkönyvek (Európai EP, Japán JP és Észak-amerikai USP) követelményeinek ipari termékek, például kozmetikumok és élelmiszerek mikrobiológiai vizsgálatára..

Másrészt érdemes megemlíteni, hogy nagy hasznossága ellenére ez a közeg viszonylag olcsó, így a legtöbb mikrobiológiai laboratórium számára megfizethető. Nagyon könnyű elkészíteni.

index

• 1 Alapítvány
• 2 Előkészítés
  • 2.1. Trypticamine szójabab
  • 2.2 - A tripticasein szójahús fajtái
• 3 Használja
• 4 Tömörített
• 5 Minőségellenőrzés
• 6 Korlátozások
• 7 Referenciák

alapítvány

A tripteína, a pepton és a glükóz biztosítja az alapvető táplálkozási tulajdonságokat ahhoz, hogy ideális táptalajsá váljon a gyors mikrobiális fejlődéshez..

A legtöbb mikroorganizmusban már körülbelül 6-8 órás inkubálás látható. Vannak azonban lassan növekvő törzsek, amelyek napokig tarthatnak.

A nátrium-klorid és a dikálium-foszfát az ozmotikus egyensúlyban és a pH-szabályozóként működik. A növekedés jelenlétét a közegben zavarosság megjelenése bizonyítja; ha nincs növekedés, a közeg áttetsző.

Világos színéből adódóan megfigyelhető a pigmentek előállítása, mint amilyen a cikk elején található képen látható, és amely megfelel az általuk előállított pigmentnek. Pseudomonas aeruginosa. 

előkészítés

-Tryptikus szójabab

A tripticase szója leves elkészítéséhez 30 gramm dehidratált kereskedelmi táptalajt mérünk digitális skálán. Ezután feloldódik egy fiolában lévő liter desztillált vízben.

Az elegyet 5 percig állni hagyjuk, majd hőforráshoz vezetjük a közeg feloldódásához. Gyorsan rázni kell 1 percig forralva.

A feloldódás után a megfelelő méretű csövekben eloszlik. Használhatók pamut dugóval vagy bakelit kupakkal ellátott csövek. Ezt követően a csöveket az autoklávban lévő közeggel 121 ° C-on 15 percig sterilizáljuk.

A közeg pH-ja 7,3 ± 0,2 legyen

Figyelembe kell venni, hogy a dehidratált táptalaj színe világos bézs színű, és száraz helyen kell tárolni 10–35 ° C-on. Míg az elkészített húsleves világos borostyán, és hűtőszekrényben (2–8 ° C) kell tárolni..

-A tripticasein szójalevél változatai

A tripticaminnal módosított szójalevest az epesók és a novobiocin hozzáadásával állíthatjuk elő annak érdekében, hogy szelektív legyen az izolálásra. E. coli. Egy másik lehetőség ugyanarra a célra a vankomicinnel, cefiximmel és tellurittal kiegészített tripticase szójalevél elkészítése (2,5 μg / ml)..

Másrészről több glükózt (0,25%) adhatunk a tripticasein szójahúshoz, ha a cél a biofilm kialakulásának ösztönzése..

használat

Elég tápláló ahhoz, hogy az igényes vagy bosszantó baktériumok, mint pl Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp és Brucella sp, nem kell vérrel vagy szérummal kiegészíteni.

Hasonlóképpen, ebben a húslevesben is előfordulhatnak bizonyos gombák, mint például Candida albicans komplexum, Aspergillus sp és Histoplasma capsulatum.

Ezen túlmenően, ez a közeg anaerob körülmények között ideális a Clostridium nemzetséghez tartozó baktériumok, valamint klinikai jelentőségű anaerob nem sporulált baktériumok kinyeréséhez..

Ha hozzáadunk 6,5% -os nátrium-kloridot, az Enterococcus és más D-csoportú Streptococcus növények növekedéséhez használható.

A kutatási szinten nagyon hasznos volt a különböző protokollokban, különösen a biofilmet vagy biofilmet képező baktériumok tanulmányozásában. Azt is használják, hogy elkészítsék a bakteriális szuszpenziót a Mac Farland 0,5% -ánál, ami szükséges az antibiotikum Kirby és Bauer módszerének végrehajtásához..

Ebben az esetben 3-5 hasonló, hasonló megjelenésű kolóniát készítünk és emulgeálunk 4-5 ml tripticasein szójalevélben. Ezt követően 2-6 órán át 35-37 ° C-on inkubáljuk, majd steril sóoldattal a kívánt koncentrációra állítjuk be. A trypticase szója levest nem szabad 18–24 órás inkubálásra használni.

beültetett

A mintát közvetlenül vagy szubkultúrájú, tiszta szelektív táptalajból származó kolóniákba lehet vetni. Az inokulumnak kicsinek kell lennie, hogy az inkubálás előtt a közeg ne legyen felhő.

Normális esetben 37 ° C-on inkubáljuk aerobiosisban 24 órán át, de ezek a körülmények a kívánt mikroorganizmustól függően változhatnak. Anaerob körülmények között is inkubálható 37 ° C-on, néhány napig, ha szükséges. Például igényes vagy lassan növekvő mikroorganizmusokban akár 7 napig is inkubálható.

A gyógyszerkészítmények mikrobiológiai elemzésében - mint a vakcinák - a protokollok szigorúbbak. Ezekben az esetekben a növekedés nélküli tápközeget nem dobjuk el, amíg el nem éri a 14 napos folyamatos inkubációt.

Minőségellenőrzés

Minden elkészített tétel esetében 1 vagy 2 csövet be kell inkubálni anélkül, hogy a sterilitást igazolnánk. Ennek változatlan maradnia kell.

Ismert törzseket is telepíthet a viselkedésük értékelésére. A felhasználható törzsek közé tartozik:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 vagy 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Minden esetben a növekedésnek megfelelőnek kell lennie az egyes mikroorganizmusok számára megfelelő atmoszférában és hőmérsékleten.

korlátozások

-A glükóz fermentációja a közeg pH-jának csökkenését okozza a savak előállításával. Ez kedvezőtlen lehet bizonyos savasságra érzékeny mikroorganizmusok túlélésére.

-Nem ajánlott a törzsek fenntartásához, mert a savasság mellett a baktériumok néhány nap elteltével kimerítik a tápanyagokat, és ennek következtében felhalmozódnak azok a mérgező anyagok, amelyek a környezetet kényelmetlenül teszik.

-Gondoskodni kell minden sterilitási protokoll gondozásáról, mivel a húsleves könnyen szennyezett.

-A tripticasein előkészítése után a szójafürtök nem próbálják át táplálni a táptalajt egy másik steril csőbe, mert az ilyen típusú manőverek nagyon érzékenyek a szennyeződésre.

referenciák

1. Cona E. Az agar diffúziós vizsgálattal végzett jó érzékenységi vizsgálat feltételei. Rev. chil. infectol. 2002; 19 (2): 77-81. Elérhető: scielo.org
2. Brit Laboratórium Tryteine ​​szójaleves. 2015-ben elérhető: britanialab.com
3. MCD laboratórium. Trytica szója leves. Elérhető: electronic-systems.com
4. Neogén laboratórium. Soy Broth Triptych. Elérhető: foodsafety.neogen.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztői Panamericana S.A. Argentína.
6. Rojas T, Vásquez Y, Reyes D, Martínez C, Medina L. A mágneses immunszeparáció technikájának értékelése Escherichia coli O157: H7 tejkrémekben. ALAN. 2006; 56 (3): 257-264. Elérhető: scielo.org.ve
7. Gil M, Merchán K, Quevedo G, Sánchez A, Nicita G, Rojas T, Sánchez J, Finol M. Biofilm képződés izoláltan Staphylococcus aureus az antimikrobiális érzékenység és a klinikai eredet alapján. Vitae. 2015-ig; 62 (1): 1-8. Elérhető: saber.ucv.ve
8. Narváez-Bravo C, Carruyo-Núñez G, Moreno M, Rodas-González A, Hoet A, Wittum T. Escherichia coli O157: H7 a szarvasmarha szarvasmarha mintáiban, a Miranda településen, Zulia államban, Venezuelában. Rev. Cient. (Maracaibo), 2007; 17 (3): 239-245. Elérhető: scielo.org