Cetrimida agar alapítvány, előkészítés, felhasználás
az cetrimid agar vagy a cetrimid egy szelektív, szilárd tenyésztő tápközeg, amelyet a Pseudomonas aeruginosa. Ez a fajra jellemző pigmentek termelésének kiemelésén alapul, és a King, Ward és Raney által létrehozott Tech agar módosításából alakult ki..
Az eredeti képlet magnézium-klorid-sókat, kálium-szulfátot, hasnyálmirigy-zselatin-emésztést és agar-agart tartalmaz. A képlet módosítása cetrimid (cetil-trimetil-ammónium-bromid) és glicerin hozzáadása volt..
A cetrimid agar alkalmas a minták mikrobiológiai vizsgálatára, ahol a jelenlétük van Pseudomonas aeruginosa. Meg kell jegyezni, hogy ez a baktérium nagy jelentőséggel bír, mert bár ez a normál környezetvédelmi mikrobióta része, gyakran úgy viselkedik, mint egy opportunista kórokozó..
Ezért az egyik leggyakoribb probléma okozta ezt a baktériumok a kórházi fertőzéseket, vagyis azok, amelyek előfordulnak a kórházi környezet, támadó betegek depressziós immunrendszerű.
Ezen túlmenően, mivel a affinitása ennek a szervezetnek a nedvességgel, fehérek sérülékenyebb szennyeződés azok: légzőkészülék, gyógyszerek, porlasztók, szökőkutak, légkondicionálók, fertőtlenítőszerek, szappan oldatok, injektálható oldatok, nyílt sebek , katéterek, a húgyúti katéterek, stb.
Ebben az értelemben a cetrimid agar hasznos a mikrobiológiai kontrollok és növények elvégzéséhez a korábban nevezett elemekhez.
index
- 1 Alapítvány
- 1.1 Értelmezés
- 2 Előkészítés
- 3 Használat
- 4 Tömörített
- 5 Korlátozások
- 6 Minőségellenőrzés
- 7 Referenciák
alapítvány
A cetrimid agar a tápközeg azon képességén alapul, hogy elősegítse a növekedést P. aeruginosa, stimulálják pigmentjeik termelését, és ezáltal gátolják más mikroorganizmusok növekedését.
Ezek a tulajdonságok az egyes komponensek funkciójának köszönhetőek. A jelen lévő zselatin pepton nitrogén, vitaminok és ásványi anyagok forrásaként szolgál. A glicerin vagy glicerin szénforrásként működik.
A cetrimid (cetil-trimetil-ammónium-bromid) az anyag, amely gátolja más baktériumok növekedését, mint a P. aeruginosa, beleértve az azonos nemhez tartozó egyéb fajokat is.
A gátlás azért következik be, mert a cetramid kationos detergensként működik, destabilizálva a legtöbb baktérium plazmamembránját, kivéve a \ t P. aeruginosa és mások, akik képesek túlélni.
Másrészt magnézium-kloridot és kálium-szulfátot tartalmaz. Ezek a vegyületek stimulálják a fenotípusos expressziót, amely a Pseudomonas aeruginosa különböző pigmentek előállítása, köztük pirocianin, pioverdin, piorubin, piomelanin és fluoreszcein. Végül agar-agart tartalmaz, amely szilárd konzisztenciát biztosít.
értelmezés
Az agarban kapott növekedés értelmezése a következő módon történik:
Megfigyelése, sima, kerek telepeket rendszeres élek, termelő kék-zöld, zöld, barna vagy vöröses pigmenteket, gyümölcsös szag kibocsátás (amino-acetofenon), egy feltételezett jelenlétének eredményeképpen ennek a baktériumnak az említett mintában.
Másrészt, ez jelzi P. aeruginosa egy fényes sárgás-zöld pigment megfigyelése a telepeken, amikor a lemez ultraibolya fénynek van kitéve.
Vegyük észre, hogy minden szín figyelhető köszönhető a termelés egy adott pigment. A kék-zöld pigmentet felel meg piocianin termelés, hogy pyoverdin zöld, vöröses piorrubina, barna zöldes piomelanina és világos sárga- fluoreszcencia ultraibolya fényben fluoreszcein.
előkészítés
Mérjünk 43 g dehidratált táptalajt, és desztillált vízben oldjuk. Adjunk hozzá 10 ml glicerint. Vegyük a keveréket egy hőforrásba. Hagyjuk néhány percig forralni, amíg teljesen fel nem oldódik.
Autokláv 121 ° C-on 15 percig. 50 ° C körüli hőmérsékleten hagyja állni és steril petri-csészékben szolgáljon.
Hagyja megszilárdulni, invertálni, megrendelni, és tárolásig hűtőszekrényben tárolja. A cetrimid agar lemezek ültetéséhez előzetesen el kell távolítani a hűtőszekrényből, és hagyni kell szobahőmérsékleten tartani..
A közeg végső pH-ja 7,2 ± 0,2 legyen.
A dehidratált közeg színe bézs, és a készítmény átlátszatlan.
alkalmazások
A cetrimid agar felhasználható mindenféle minta beültetésére, amelyben a jelenlétük van Pseudomonas aeruginosa. Ezért hasznos a mikrobiológia minden területén (környezetvédelmi, ipari, klinikai, víz- és élelmiszeripar).
Nagyon fontos, hogy elemezze a kórházi környezetben, és képes alkalmazni a korrekciós közvetített, mivel ez a mikroorganizmus eléri betegek számára felszerelések, gyógyszerek, megoldások és a szennyezett bemenet esetén a beteg által.
Ily módon a mikroorganizmus megfertőzheti az immunszuppresszált betegek alsó légúti, húgyúti és sebgyógyászati betegségeit..
A kolóniák száma is elvégezhető P. aeruginosa mikrobiális határérték-vizsgálatokban.
beültetett
A cetrimid agar primer tenyészetként alkalmazható. A lemezt az egyik szélén oltjuk be, és onnan kimerülve elosztjuk a lemez többi részét. A folyékony mintákat drigalski spatulával lehet a felszínre vetni.
A lemezeket aerobiosisban inkubáljuk 37 ° C-on 24 órán át inkubálva.
korlátozások
-Egy kis százalékos törzsek Pseudomonas aeruginosa ne termeljen pirocianint, így egy hamis negatív eredményt értelmezhet.
-Ebben a táptalajban bizonyos klinikai jelentőségű Pseudomonas fajok gátolódnak.
-Annak ellenére, hogy betartják a leírt jellemzőket Pseudomonas aeruginosa, azokat további azonosító tesztekkel kell igazolni. Egy teszt, amelyet nem lehet hiányozni, az oxidáz teszt, pozitívnak kell lennie.
-Bizonyos enterobaktériumok ebben a táptalajban növekedhetnek és sárga pigmentet képezhetnek, de különbözik attól Pseudomonas aeruginosa amelyben a lemez ultraibolya fényre való felvitelekor nincs fluoreszcencia.
-Serratia marcescens sikerül kialakítani és rózsaszín pigmentet termelni.
-Ha a cetrimid agarral beoltott plakkok egy ideig szobahőmérsékleten vannak kitéve, akkor a P. aeruginosa elveszíthetik az ultraibolya fényben megfigyelt fluoreszcenciát, azonban a tulajdonságot visszanyerjük, ha 37 ° C-on újra inkubáljuk..
Minőségellenőrzés
A cetrimid-agar megfelelő működésének teszteléséhez kontrolltörzsek alkalmazhatók, például: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 és Staphylococcus aureus ATCC 25923.
A várt eredmények:
- hogy P. aeruginosa jó növekedés, kék-zöldes pigment és pozitív fluoreszcein.
- S. maltophilia és S. aureus részben vagy teljesen gátolódik.
- Ez várható Escherichia coli teljesen gátolt.
referenciák
- Callicó A, B Cèdre, Sifontes S, Torres V, Pino és Callis, A, Esnard S. fenotípusos és szerológiai klinikai izolátumok Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
- Laboratóriumok Conda Pronadisa. Cetrimid agar bázis. 2014. Elérhető: condalab.com
- Laboratóriumok Britania. Cetrimida agar. 2015-ben elérhető: britanialab.com
- BD laboratóriumok BD Pseudosel agar (Cetrimid agar). 2013. Elérhető: bd.com
- Francisco Soria Melguizo Laboratory, C.A. Cetrimid agar. 2009. Elérhető: http://f-soria.es