MacConkey Agar alapítvány, előkészítés és felhasználás

az MacConkey agar Ez egy szilárd tápközeg, amely lehetővé teszi a Gram-negatív bacillák kizárólagos izolálását. Emiatt szelektív táptalaj, és lehetővé teszi a laktóz fermentáció és nem fermentálódó bacillák megkülönböztetését is, ami differenciált közegvé teszi. A mikrobiológiai laboratóriumban az egyik legelterjedtebb táptalaj.

Ezt a tápközeget elsősorban a családhoz tartozó Gram-negatív bacillák izolálására használják Enterobacteriaceae, beleértve az opportunista és enteropathogén fajokat is.

Alkalmazható más, a gyomor-bélrendszerben élő bélben lévő bacillák izolálására is, de nem tartoznak ide Enterobacteriaceae, mint Aeromonas sp, Plesiomonas sp, többek között.

Végül elkülöníthet más, a környezetben, a vízben vagy a talajban található gram-negatív, nem fermentálódó glükózbacillákat, de ezek néha lehetnek opportunista kórokozók, mint pl. Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkaline sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, többek között.

index

• 1 Alapítvány
  • 1.1 MacConkey Agar
• 2 Előkészítés
• 3 A hagyományos MacConkey agar használata
• 4 A MacConkey agar egyéb változatai
  • 4.1. MacConkey-agar szorbittal
  • 4.2. MacConkey agar kristályos lila vagy só nélkül
  • 4.3 MacConkey agar cefoperazonnal
  • 4.4 MacConkey Agar 10% tengeri víztartalommal
• 5 Referenciák

alapítvány

MacConkey Agar

Ennek a médiumnak az alapja az összetevőinek leírásával magyarázható, mivel mindegyiknek van egy célja, amely meghatározza annak tulajdonságát.

Epesók és lila kristályok

Ebben az értelemben a MacConkey agar komplex összetételű. Először epe-sókat és lila kristályokat tartalmaz.

Ezek az elemek felelősek a Gram-pozitív baktériumok és néhány Gram-negatív bacilli növekedésének gátlásáért. Ez viszont előnyben részesíti a Gram-negatív bacillák kifejlesztését, amelyeket ezek az anyagok nem befolyásolnak. Ezért egy szelektív közeg.

Úgy vélik, hogy kissé szelektív a más közegekhez képest, amelyek gátolják a Gram-pozitív baktériumok és a legtöbb Gram-negatív baktérium növekedését is.

Rendkívül szelektív egy adott nemzetséghez, például a TCBS agarhoz Vibrio cholerae és más hasonló halofil és alkalofil fajok.

Peptonok, polipononok és laktóz

Olyan anyagokat tartalmaz, amelyek a tápközegben kialakuló mikroorganizmusokhoz, például peptonokhoz, polipononokhoz és laktózhoz biztosítják a szükséges tápanyagokat.

A laktóz kulcsfontosságú pontja annak, hogy a közeg differenciált médium legyen, mivel a laktózt erjesztő mikroorganizmusok erős rózsaszín kolóniákat hoznak létre..

Egyes baktériumok lassan vagy gyengén fermentálhatnak laktózt, halvány rózsaszín kolóniákat fejlesztve és pozitív laktóz maradnak.

Azok, akik nem fermentálják a laktózt, energiaforrásoként peptonokat használnak, ami ammóniát termel, lúgosítja a közeget. Ezért a kolóniák színtelenek vagy átlátszóak.

PH jelző

A színváltozás egy másik lényeges, MacConkey-agart tartalmazó összetevővel érhető el. Ez a vegyület a pH-mutató, amely ebben az esetben semleges vörös.

A laktóz fermentálása vegyes savak előállítását eredményezi. A pH-t 6,8-nál alacsonyabb pH-értékre savanyítjuk..

Ezzel a pH-mutató intenzív rózsaszín árnyalat felé fordul. A szín intenzitása a végső pH-tól függően változhat.

Desztillált víz, nátrium-klorid és agar

Másrészt tartalmaz desztillált vizet és nátrium-kloridot, amely a közeghez hidratálást és ozmotikus egyensúlyt biztosít. Végül a közeg agart tartalmaz, amely a szilárd közeg konzisztenciáját biztosító bázis.

Az elkészített MacConkey agar tápközeg végső pH-ját 7,1 ± 0,2 értékre kell beállítani..

előkészítés

Egy liter MacConkey-agarhoz 50 g dehidratált tápközeget kell mérni, majd egy fiolába helyezni és egy liter desztillált vízben feloldani. 10 percnyi pihenés után folyamatosan melegítjük, amíg 1 percig forralunk.

Ezután tegyük a fiolát az autoklávba és sterilizáljuk 121 ° C-on 20 percig. Az idő végén az autoklávból eltávolítjuk és 45 ° C-ra hagytuk lehűlni, majd steril petri-csészékben tálaljuk egy lamináris áramlású motorháztetőben vagy a Bunsen-égő előtt..

Hagyjuk megszilárdulni és tárolni egy lemeztartóban, fordítva és hűtőszekrényben, 2-8 ° C-on, használatig.

Ahhoz, hogy egy MacConkey agart kapjunk, amely gátolja a Proteus nemzetség által előidézett nyálkás hatást, egy alacsony sót tartalmazó MacConkey agart használunk..

A hagyományos MacConkey-agar használata

A MacConkey agar a laboratóriumban kapott klinikai minták vetésére szolgáló összes tápközegkészletben szerepel. Hasznos az élelmiszer mikrobiológiában és a környezet mikrobiológiájában is.

Az ebben a táptalajban növekvő Gram-negatív bacillák olyan fenotípusos jellemzőket fejeznek ki, amelyek elősegítik a szóban forgó faj feltételezett diagnózisát. Például a kolóniák mérete, színe, konzisztenciája és szaga néhány olyan jellemző, amelyek irányíthatók.

Ebben a környezetben a fajok Escherichia coli, Klebsiella sp és Enterobacter sp erős rózsaszínű telepeket termelnek, amelyeket egy kicsapódott epe vesz körül.

Annyi baktériumban, mint Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp és Hafnia sp 24 óra múlva szín nélkül jelenhetnek meg, vagy 24-48 óra alatt halvány rózsaszín.

Hasonlóképpen a Proteus, Edwadsiella, Salmonella és Shigella nemzetek színtelen vagy átlátszó telepeket termelnek.

A MacConkey agar egyéb változatai

Vannak más MacConkey agar variánsok is, amelyek speciális célokat szolgálnak. Ezután megemlítik:

MacConkey agar szorbittal

Ezt a közeget úgy tervezték, hogy megkülönböztesse az enteropatogén törzset (Escherichia coli enterohemorrhagiás O157: H7). \ t Escherichia coli.

Ez a tápközeg megváltoztatja a szénhidrát laktózt szorbitként. A. \ T E. coli enterohemorrhagiás O157: H7 különbözik a többiektől, mert nem fermentálják a szorbitot, ezért átlátszó kolóniákat kapnak, azonban a többi törzs E. coli ha a szorbitot erjesztik, és a telepek erős rózsaszínűek.

MacConkey Agar kristályos lila vagy só nélkül

Ez az agar nagyon különbözik a klasszikus MacConkey-agartól, mivel nem rendelkezik kristály violettal, a Gram-pozitív baktériumok növekedhetnek.

Másrészről a só hiánya gátolja az enterális bacillák által előállított agarok megjelenését, mint például a nemzetségbe tartozó agarok. Proteus, és ezáltal megkönnyíti a jelenlévő baktériumok, beleértve a Gram-pozitív baktériumokat, izolálását.

MacConkey agar cefoperazonnal

A MacConkey agarnak ezt a variánsát úgy tervezték, hogy kezdetben elkülönítse Laribacter hongkongensis és később rájöttek, hogy hasznos volt a Arcobacter butzleri. AMindkettő enyhén ívelt negatív Grambacillus, amely ellenálló a cefoperazonnal szemben.

Ezek a baktériumok a közelmúltban kapcsolódnak az ázsiai és európai egyénekben megszerzett gastroenteritis és hasmenés okai közé, amelyek két erős fejlődő kórokozóvá válnak..

Az antibiotikum lehetővé teszi a gasztrointesztinális traktus kísérő növényvilágának gátlását, amely elősegíti e baktériumok fejlődését, megakadályozva, hogy észrevétlenek legyenek, mivel 72 órát igényelnek..

MacConkey Agar 10% tengeri vízzel készítve

Ez a változat hasznos a széklet-szennyeződés bakteriális egészségi mutatóinak, beleértve a teljes kolibaktériumokat és a fekális koliformákat rekreációs sós vizekben (strandok és öblök), értékelésére..

Cortez és munkatársai 2013 azt mutatták, hogy az így előállított közeg jelentősen növeli ezeknek a mikroorganizmusoknak a visszanyerését a sós környezetben, összehasonlítva a desztillált vízzel készített MacConkey agar alkalmazásával..

Ez azért van, mert a módosított tápközeg stimulálja a fiziológiásan "életképes, de nem művelhető" állapotban lévő fiziológiás baktériumok növekedését, ezért a hagyományos közegben nem hasznosíthatóak.

referenciák

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT et al. A cefoperazon MacConkey agar alkalmazása a szelektív izoláláshoz Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. "MacConkey Agar." Wikipédia, A szabad enciklopédia. 2018. április 4., 18:16 UTC. 2018. december 29., 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Argentínában. Panamericana S.A szerkesztő.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. (5. kiadás). Argentína, szerkesztő Panamericana S.A..
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. A tengervízzel készített táptalaj hatása a Chichiriviche gyógyfürdők, Falcón állam, Venezuela tengeri vizei egészségügyi mutatóira. Rev Soc Come Microbiol 2013 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Gyakorlati klinikai mikrobiológia. Cadizi Egyetem, 2. kiadás. UCA Kiadványok Szolgáltatása.