Tápláló agar alapozás, előkészítés és felhasználás

az tápláló agar ez nem szelektív és nem differenciált szilárd táptalaj. Ebben a környezetben mindenféle baktériumot nem táplálunk táplálkozási szempontból.

Ez egy egyszerű eszköz, és a neve ellenére alacsonyabb tápértéket mutat a többi hasonló tápközeghez képest, mint például agyi szív infúziós agar vagy triptázis szója agar..

Hasznossága a laboratóriumban igen változatos. Főként a fajok szubkultúrájára, a törzsek fenntartására, a telepek számlálására használják, mint pl..

Hasonlóképpen, világos bézs színe miatt egyes baktériumtörzsek által termelt pigmentek, mint például a zöldes pigment. Pseudomonas aeruginosa, a Serratia marcescens szobahőmérsékleten, az arany sárga pigmentje Staphylococcus aureus, többek között.

Ezenkívül a piac egyik leggazdaságosabb termelési adathordozója.

index

• 1 Alapítvány
• 2 Összetétel
• 3 Előkészítés
• 4 Felhasználások
  • 4.1 A vér agar előállításának alapja
  • 4.2 A spóraképző baktériumok sporulációjának ösztönzése
  • 4.3 A törzs karbantartása
  • 4.4. Colony számlálás
  • 4.5 Diagnosztikai vizsgálatok végrehajtása
  • 4.6 A mezofil aerob szabadidős sós vizek helyreállítása (strandok)
• 5 Referenciák

alapítvány

Mint már említettük, ez egy nagyon egyszerű eszköz, amely a tápanyagokat a bakteriális növekedéshez korlátozás nélkül és komplex reakciók nélkül értelmezi..

Mivel a közeg áttetsző, ideális a telepek mélység szerinti vetés módszerével történő számláláshoz.

összetétel

Főleg húskivonatból vagy élesztőkivonatból, peptonokból vagy hasnyálmirigy zselatin emésztésből, agar-agarból, nátrium-kloridból és desztillált vízből áll..

A hús vagy az élesztő és a peptonok kivonata a szén és az alapvető ásványi anyagok (nitrogén, foszfor és kén) forrását jelenti, amelyet a baktériumok energiaforrásként és növekedési tényezőként használnak fel.

Hasonlóképpen, az agar-agar az összes szilárd tenyésztő tápközeg alapja, amely helyettesíti a zselatint, amely az első alapanyag, amelyet Robert Koch használt a médium szilárd szilárdságának biztosítására..

Az agar egy poliszacharid, amely galaktózból, galaktomannánból, agarózból és agaropektinből áll. 40 ° C-on áll, és közel 100 ° C-ra olvad.

A nátrium-klorid a baktérium fejlődéséhez szükséges ozmolaritást biztosítja.

Végül a víz a liofilizált vegyületek hidratálására és feloldására szolgál. A semleges pH-ra beállított desztillált vizet kell használni. A csapvizet nem szabad használni, mert kalciumot és magnéziumot tartalmaz, amely képes reagálni a közegben lévő foszfáttal és oldhatatlan sókat képez.

előkészítés

Egy liter tápláló agar esetében 31 g dehidratált közeget kell mérni. Egy fiolába helyezzük és egy liter desztillált vízben oldjuk. 5 perces pihenés után melegítsen egy hőforráson, és folyamatosan keverje addig, amíg 1 vagy 2 percig forral.

Ezután tegyük a fiolát autoklávba és sterilizáljuk 121 ° C-on 20 percig.

Az idő végén az autoklávból eltávolítjuk és steril petri-csészékben tálaljuk, lamináris áramlású motorháztetővel vagy Bunsen-égővel..

Ha a Petri-csészék eldobhatóak (műanyag), akkor a tápközeget akkor kell elosztani, ha az agar hőmérséklete körülbelül 50 ° C, hogy megakadályozzák, hogy túlzott hővel deformálódjanak.

Hagyjuk megszilárdulni és tárolni egy lemeztartóban, fordítva és hűtőszekrényben, 2-8 ° C-on, használatig.

A lemezeket vetés előtt le kell temperálni. A tápláló agarlemezeket nem szabad használni, ha szennyezett vagy dehidratált.

Az előkészített közeg pH-ját 7,3 ± 0,2 értékre kell beállítani.

alkalmazások

A mikrobiológiai laboratóriumban használt legegyszerűbb táptalaj. A készítmény kiválóan alkalmas a nem igényes baktériumok növekedésére.

Fő felhasználási területeit az alábbiakban ismertetjük:

A vér agar előállításának alapja

Ezt a tápközeget néha bázisként használják a vér-agar előállítására, de ez nem a leggyakrabban használt bázis.

A spóraképző baktériumok sporulációjának ösztönzése

Ez a tenyésztőközeg különösen hasznos a spóraképző baktériumok, mint pl Bacillus sp.

Ehhez egy nemzetség törzsét vetik be bacilus és 24 órán át 37 ° C-on inkubáltuk aerobiosisban. Miután a telepeket tenyésztették, a lemezt hőmérsékletnek vetjük alá, vagyis a tűzhely hőmérsékletét 44 ° C-ra emeljük, és 24 órán át tovább hagyjuk, vagy 24 órán át hűtőszekrényben vezetjük be..

A termés végén a tenyészeteket meghosszabbítjuk és festjük Gram festéssel vagy Shaeffer-Fulton spórafestéssel. Ezekben a bacillák endoszporákkal (spórák a bacillusban) és exosporák (spórák a bacilluson kívül) figyelhetők meg..

A törzs karbantartása

Egyes kutató laboratóriumoknak vagy egyetemi oktató laboratóriumoknak a lehető leghosszabb ideig meg kell őrizniük az életképes, klinikailag fontos baktériumokat, hogy a baktériumbankot (bakterioteka) kutatási munkára vagy a tanítási gyakorlatok előkészítésére használják. A diákok megtanulják manipulálni és azonosítani ezeket a mikroorganizmusokat.

A tápláló agar, valamint az agyi szív infúziós agar is használható erre a célra. Az agart előállítjuk, öntjük bakelitfedelű csövekbe, és egy bázisra billentjük oly módon, hogy az agar megszilárduljon, és alján egy tömböt képez, és a felületen egy ferde csúcsot képez..

Minden csövet a beültetendő baktériumok elnevezésével és a dátummal jelöltük. Az előlapon minden baktériumot ültetünk és 24 órán át inkubálunk, miután a telepeket növesztettük, a csöveket szobahőmérsékleten tároltuk..

A baktériumot 1-3 hónapig meg kell újítani, hogy elkerüljük a közeg szennyeződését és kiszáradását, valamint a baktériumok halálát..

Ilyen módon csak a nem igényes baktériumok tarthatók fenn.

Colony számlálás

Bár léteznek speciális eszközök a kolóniák számlálására, mint például a standard számláló agar, erre a célra tápláló agar használható, akár a felületen drigalski spatulával, akár mélységgel. Ezért nagyon hasznos az élelmiszer és a víz mikrobiológiai elemzésében.

Diagnosztikai tesztek végrehajtása

Mert olyan közeg, amely nem tartalmaz vért vagy más adalékanyagot, ideális, ha ebben a táptalajban tenyésztett telepeket veszünk a kataláz teszt elvégzésére..

Hasonlóképpen, tiszta színének köszönhetően az oxidáz teszteket közvetlenül a beoltott agar felületén végezzük, interferencia nélkül..

Mesofil aerob szabadidős sós vizek (strandok) visszanyerése

A 10% -os tengervízzel előállított tápanyag-agar hasznos a mezofil aerobok értékeléséhez a tengerparti vizekben.

Ily módon értékelhetjük a vizek reálszennyeződésének szintjét ezen mikroorganizmusokkal, mivel az ilyen típusú mintákban az eredményeket átfedik, ha a szokásos módon előállított táptalajt használjuk..

Ezt Cortez et al. 2013-ban egy kutatási munkában.

Ez magyarázható a hirtelen változás következtében, amikor a baktériumok hiper-sóoldatból egy alacsony sókörnyezetbe kerülnek, ezért a mikroorganizmusok letargia állapotba kerülnek, amelyben életképesek, de nem termeszthetőek.

referenciák

1. "Tápláló agar." Wikipédia, A szabad enciklopédia. 2016. szeptember 13., 20:33 UTC. 2018. december 29., 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Argentínában. Panamericana S.A szerkesztő.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. (5. kiadás). Argentína, szerkesztő Panamericana S.A..
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. A tengervízzel készített táptalaj hatása a Chichiriviche gyógyfürdők, Falcón állam, Venezuela tengeri vizei egészségügyi mutatóira. Rev Soc Come Microbiol 2013 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M és Cardoso M. A mikrobiológiai minőség az adagoláshoz, Suinos számára.Cient.Agro.Amaz. 2013 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Gyakorlati klinikai mikrobiológia. Cadizi Egyetem, 2. kiadás. UCA Kiadványok Szolgáltatása.