Agar só és manitol alapozás, elkészítés és felhasználás

az só agar és mannit vagy sós mannit egy szilárd, szelektív és differenciált táptalaj. A Chapman kifejezetten a patogén Gram-pozitív kokszok izolálására hozott létre Staphylococcus aureus.

Ugyanakkor hasznos is izolálni Staphylococcus epidermidis, amely esetenként opportunista kórokozóként is jelen lehet, és Staphylococcus saprophyticus, más fajok körében elismert vizelet patogén.

Néhány Enterococcus képes növekedni ebben a közegben, valamint bizonyos Gram-pozitív spóraképző bacillákban.

Ez a közeg nagyon hasznos a klinikai minták elemzésében, de az élelmiszerek mikrobiológiai vizsgálatában és az ipari termékek, például kozmetikumok, gyógyszerek minőségellenőrzésében is használatos..

A sózott mannit-agar marhahús, triptein, mannit, nátrium-klorid, fenolvörös és agar kivonatokból és peptonokból áll..

index

• 1 Alapítvány
• 2 Előkészítés
• 3 Használat
• 4 Minőségellenőrzés
• 5 Végső megfontolások
• 6 Referenciák

alapítvány

A mannit-agar szelektív a nagy sótartalmának köszönhetően. A sótartalom gátló anyagként működik, és megakadályozza a Gram-negatív baktériumok növekedését.

A mannit-szénhidrát és a fenol-vörös pH indikátor jelenléte miatt is differenciálódik. Ebből a mannit erjesztésére képes baktériumok savakat képeznek, a közeget savanyítják, a kolóniákat és a közepes sárga színt fordítva..

Másrészt a mannitot nem erjesztő telepek nőnek a közegben, a hús és a tripteína kivonatai és peptonái által biztosított tápanyagokat felhasználva. Innen a baktériumok kivonják a növekedésükhöz szükséges szén-, nitrogén-, vitamin- és ásványi anyagokat.

A kolóniák ebben az esetben gyenge vagy erős rózsaszínűek lehetnek, és a közeg ugyanolyan színű, vagy változik a fuksziában.

Az agar az anyag, amely biztosítja a közeg konzisztenciáját.

előkészítés

Egy liter sózott mannit-agar előállításához 111 g dehidratált közeget a kereskedelmi forgalomban lévő házból mérünk, és 1000 ml desztillált vízben oldunk fiolát használva..

A hőt úgy alkalmazzuk, hogy a közeget gyakran eltávolítjuk az oldódási folyamat javítása érdekében. Hagyjuk forralni egy percig.

Helyezze a fiolát az autoklávba 121 ° C-on 15 percig.

Az idő végén a fiolát kivesszük az autoklávból, hagyjuk állni, és steril petri-csészéknél 15 és 20 ml között szolgálják, amikor a hőmérséklet körülbelül 50-55 ° C..

Megengedett, hogy megforduljon, fordított formában rendeljünk plaqueros-hoz, és hűtőszekrényben tartjuk a használatáig. A minta beültetése előtt meg kell várni, hogy a lemez a környezet hőmérsékletét vegye.

A lemezeket súrlódással, vagy a felszínen egy drigalski spatulával vetik. Az elkészített közeg végső pH-ja 7,4 ± 0,2 legyen

A dehidratált közeg színe világos bézs, az elkészített közeg színe narancssárga.

alkalmazások

Magas szelektivitása miatt ez a közeg ideális vegyes növényvilágú minták beültetésére, ahol az ember kívánja megtalálni a jelenlétét Staphylococcus aureus, mint ez a nemzetség fő kórokozója.

Ebben az értelemben az egyik leggyakoribb felhasználása a garat exudátumok és az orrüregek mintáinak mikrobiológiai elemzése, különösen az aszimptomatikus hordozók kimutatására. S. aureus.

Egyes országok ezt az elemzést kötelezővé tették az emberek számára, akik élelmiszer-szállítóként akarnak dolgozni.

Ez a vezérlés megakadályozza, hogy olyan személyeket béreljenek, akik fuvarozók S. aureus, így elkerülve a hatalmas ételmérgezést, staphylococcus enterotoxinnal szennyezett élelmiszerek fogyasztása miatt.

Ez többek között a sebfertőzések, a vérkultúrák, a CSF, a bronchoalveoláris levágás vetésében is alkalmazható..

A sózott mannit-agar hasznosítható a CLED-agarból vagy vér-agarból származó vizeletkultúrák kolóniáinak újbóli izolálására, amelynek grammjai Gram-pozitív kokszokat tártak fel klaszterekben.

Ez érvényes az élelmiszer, az ivóvíz, a talaj mikrobiológiai elemzésére is.

Minőségellenőrzés

Miután elkészítettük a sózott mannit-agarral ellátott lemezeket, célszerű egy minőségellenőrzést végezni. A kontroll törzseket vetjük, hogy megmutassuk, hogy van-e növekedés.

Pozitív kontrollként az ismert törzsek Staphylococcus aureus. Sárga kolóniák kifejlesztésével kielégítően kell növekednie, és a közeg ugyanolyan színűvé válik.

Hasonlóképpen célszerű egy ismert törzset is alkalmazni Staphylococcus epidermidis. A rózsaszín kolóniák kifejlesztésével kielégítően kell növekednie, és a tápközeg ugyanolyan színű marad, vagy erősebb rózsaszínben sötétebb lesz.

Negatív kontrollként olyan törzseket használunk, amelyek nem növekedhetnek ebben a táptalajban. Például egy ismert törzset beültethet Escherichia coli vagy Klebsiella pneumoniae. A várt eredmény a teljes gátlás, vagyis nem a növekedés.

Ezenkívül inokulálást nem tartalmazó lemezt kell inkubálni. Ebben nem lehet növekedés, színváltozás.

Fontos, hogy a lemezt ne használják, ha vannak olyan jelek, mint pl. Szennyeződés, dehidratáció, elszíneződés..

Végső megfontolások

A sózott mannit-agar tápközeg használata során néhány fontos szempontot figyelembe kell venni:

-A sárga telepek növekedésének megszerzése nem jelenti azt, hogy ez a helyzet Staphylococcus aureus. Emlékeztetni kell arra, hogy az Enterococcus egyes törzsei képesek növekedni ebben a táptalajban és erjeszteni a mannitot, valamint bizonyos Gram-pozitív spóraképző bacillákat..

Ezért fontos, hogy a kolóniára és a kataláz tesztre egy grammot végezzünk.

-Másrészt úgy kell tekinteni, hogy más Staphylococcus fajok különböznek aureus Ezek is képesek a mannit erjesztésére. Ezért fontos, hogy a kolóniát egy tápanyag-tápközegre tenyésztjük, és onnan vegyük le a koaguláz tesztet.

A mannitot erjesztő ember klinikai jelentőségű Staphylococcus-fajtája a következők: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, többek között.

Mások változó reakciót adhatnak, ami néha pozitív és néha negatív. Néhányan vannak S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, többek között.

-A koaguláz teszt elvégzéséhez nem ajánlott közvetlenül telepíteni a telepeket mannit-agarból, mivel a tápközeg magas sókoncentrációja befolyásolhatja az eredményt.

-Végül ajánlatos 48 órán át inkubálni a sózott mannittal beoltott lemezeket, mivel az egyes törzsek \ t S. aureus A mannitot lassan fermentálhatják, bár ez nem túl gyakori.

referenciák

1. Laboratóriumok Britania. Mannit sós agar. 2015-ben elérhető: britanialab.com
2. "Sós mannit-agar". Wikipédia, A szabad enciklopédia. 2018. október 31., 19:08 UTC. 2019. január 17., 20:55, elérhető: en.wikipedia.org.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. (5. kiadás). Argentína, szerkesztő Panamericana S.A..
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Argentínában. Panamericana S.A szerkesztő
5. BD laboratóriumok BD Mannitol Salt Agar. 2013. Elérhető: bd.com.