Agar Salmonella-Shigella alapítvány, előkészítés és felhasználás

az Salmonella-Shigella agar SS agar néven is ismert, közepesen szelektív és differenciált közeg, amelyet kifejezetten a Salmonella és Shigella nemzetségek enteropatogén baktériumainak izolálására terveztek mind környezeti, mind klinikai mintákból..

Az SS agar komplex összetételű; Húskivonatból, peptonból, laktózból, epesókból, nátrium-citrátból, nátrium-tioszulfátból, vas-citrátból, agarból, semleges vörösből, világos zöldből és desztillált vízből áll. Nagy szelektivitása miatt a bőséges vegyes növényvilággal rendelkező mintákat lehet ültetni.

A mikrobiológiai laboratóriumokban a Salmonella-Shigella táptalajt széles körben használják a szalmonella és a shigella jelenlétének vizsgálatára hasmenéses széklet, szennyvíz, ivóvíz és élelmiszer mintákban.

Előfordulhat, hogy a Salmonella törzsek helyreállításához előzetesen dúsító húsleveseket (laktózleves) és dúsítást (selenit cisztin-levest) kell használni..

Ezeket a lépéseket akkor kell elvégezni, ha a Salmonella létezését nagyon alacsony mennyiségben feltételezik, vagy ha a törzset az ipari termelésre jellemző eljárások, főként feldolgozott élelmiszerek kezelhetik. Szintén ajánlatos az antibiotikumokkal kezelt betegek székletmintáit gazdagítani.

Ezt követően a dúsított táptalajt Salmonella-Shigella agarra és más hasonló táptalajokra, például xilóz agarra, deoxisziloxán-lizinre (XLD) és enterális Hektoen agarra (HE) lehet beoltani..

index

• 1 Alapítvány
  • 1.1 Táplálkozási teljesítmény
  • 1.2 Következetesség
  • 1.3 Szelektív
  • 1.4 Differenciál
• 2 Előkészítés
• 3 Használja
• 4 Korlátozások
• 5 Minőségellenőrzés
• 6 Referenciák

alapítvány

A Salmonella-Shigella tenyésztőközeg mindegyik komponense specifikus funkcióval rendelkezik, és a keverék egésze azt a tulajdonságot adja, amely jellemzi.

Tápláló hatalom

A húskivonat és a pepton (emésztett kazein és állati szövet) biztosítja a szükséges tápanyagokat (nitrogének, szén és vitamin) a mikroorganizmusok kifejlesztéséhez, amelyek képesek elviselni a többi komponenst.

következetesség

Az agar-agar felelős a szilárd anyag szilárdságának biztosításáért.

szelektív

Ez a közeg rendkívül szelektív, mert epesókat, nátrium-citrátot és élénkzöldet tartalmaz. Ezért gátolja az összes Gram-pozitív baktérium és a Gram-negatív bacillák, köztük néhány kolibaktérium növekedését..

Míg a Salmonella nemzetségbe tartozó baktériumok és néhány Shigella törzs támogatja ezeket a vegyületeket.

Főként a Salmonella nemzetség nagyon ellenáll az epesóknak, annyira, hogy képesek bizonyos hordozóbetegek epehólyagjában élni, akik folyamatosan kiürítik a baktériumokat a székleten keresztül.

differenciális

A laktóz a fermentálható szénhidrát, amely segíti a laktóz fermentációs törzsek megkülönböztetését a nem fermentáló törzsektől. Ezt a tulajdonságot a pH-indikátor jelenléte bizonyítja, amely ebben a közegben fenolvörös.

A laktóz fermentáló törzsek vörös kolóniákat adnak, míg a nem fermentáló törzsek színtelenek. Ez a jellemző fontos, mivel a Salmonella és a Shigella nem fermentálja a laktózt.

Másrészt, ez a közeg nátrium-tioszulfátot tartalmaz kén és vas-citrát forrásaként vasforrásként. Mindkét vegyület képes megkülönböztetni a hidrogén-szulfid előállítására alkalmas baktériumokat. Ezek reagálnak, hogy fekete csapadékot képezzenek oldhatatlan és látható vas-szulfidból.

Ez a tulajdonság a Salmonella nemzetség néhány törzsével rendelkezik. Általában a telepek színtelen laposak, fekete közepén. A Salmonellák többi része nem termel H-t₂S és színtelen kolóniák formájában alakul ki.

Másrészről a Shigella nemzetség telepei színtelenek, feketék nélkül.

előkészítés

Ez nagyon egyszerű előkészítés.

Mérjünk be 63 g dehidratált kereskedelmi közeget, és egy liter desztillált vízben oldjuk. Az oldatot melegítjük és keverjük. A keverék akár percekig is forrhat.

Ez a közeg nem autoklávozhat. Feloldódása után közvetlenül egy vagy kettős steril lemezre szolgál.

Szilárdításkor a foltok készítői fordított irányban vannak elrendezve, és hűtőszekrényben (2-8 ° C) tárolják, amíg fel nem használják.

Az előkészítés után a tápközegnek pH = 7,2 ± 0,2 és narancssárga vörösnek kell lennie.

Fontos, hogy a lemezeket a minták vetését megelőzően temperálni lehessen. Az eredeti mintát közvetlenül el lehet vetni, az anyagot az agar egy részére, majd onnan kimerüléssel üríteni.

Dúsított húsleves használata esetén adja át a szelenit húsleves egy részét és vetje el a drigalski spatulával..

Inkubáljuk 37 ° C-on 24 órán át aerobiosisban.

Ne feledje, hogy a mérendő gramm mennyisége és a közeg végső pH-értéke kereskedelmi házonként változhat. A közeg alaplemeze mindig az előkészítésre utaló jelzéseket adja.

használat

Gyakran használják a székletkultúrák és a maradékvízminták, az ivóvíz és az élelmiszer mikrobiológiai vizsgálatában.

Gyakran előállítanak kettős lemezeket, az egyik oldalon Salmonella-Shigella agart és a másik oldalon XLD agart..

korlátozások

-Néhány Shigella törzs ebben a táptalajban nem nő. Ezért nem ajánlott ez a nemzetség elsődleges izolálása.

-Nem minden világos kolónia a fekete központtal jelzi a Salmonella-t; biokémiai vizsgálatokat kell végezni a helyes azonosítás érdekében, mivel a Proteus egyes törzseinek kolóniái megkülönböztethetetlenek a Salmonella törzseivel..

-A dehidratált közegnek óvatosnak kell lennie a környezetnek való kitettséggel, mivel nagyon higroszkópos. Ezért száraz és jól zárt környezetben kell tartani. Nagyon rövid ideig nyitva.

-Idővel a tápközegben levő epesók csapódhatnak ki, és az agaron belül matthoz hasonló képet alkotnak, de ez nem befolyásolja az eredményeket.

-Néhány Shigella törzs lassan fermentálhatja a laktózt.

Minőségellenőrzés

Annak igazolására, hogy a közeg megfelelően működik, ajánlatos ismert vagy hitelesített törzseket ültetni és megfigyelni, hogy a növekedés megfelel-e a várt jellemzőknek..

Ebből a célból a E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium vagy Enterococcus faecalis.

A várt eredmények:

Escherichia coli --rózsaszín konvex telepek.

Enterobacter és Klebsiella- nagy telepek és vörös vagy rózsaszín nyálkahártya.

Shigella flexneri --tiszta vagy színtelen lapos telepek.

Salmonella typhimurium - színtelen telepek fekete középponttal.

Enterococcus faecalis-- teljes gátlás.

referenciák

1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009. Elérhető: f-soria.es
2. BD laboratórium. BD Salmonella-Shigella agar. 2013. Elérhető: bd.com
3. Laboratóriumok Britania. Salmonella-Shigella agar. 2015-ben elérhető: britanialab.com
4. Valtek diagnosztika. Salmonella-shigella agar (SS agar) .2010. Elérhető: andinamedica.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Szerkesztői Panamericana S.A. Argentína.
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. 5. ed. Szerkesztői Panamericana S.A. Argentína.