Szója agar tripticaseína alapítvány, előkészítés és felhasználás

az trypticasein szója agar vagy trypticase soy agar egy szilárd, nem szelektív és tápláló tápközeg. Az angol Trypticase Soy Agar betűjelének TSA betűjével van jelölve. Tripteint, szója peptont, nátrium-kloridot és agar-agart tartalmaz.

Magas táplálkozási teljesítménye miatt ideális közepesen igényes és nem igényes mikroorganizmusok termesztéséhez. A kiegészítő táplálék nélküli tápközeg primer tenyészeteknél nem ajánlott, de nagyon hasznos a tiszta törzsek szubkultálásához és életképességének megőrzéséhez..

Továbbá, ez az agar alapul szolgál a dúsított tápközegek, például a vér-agar előállítására, különösen akkor, ha szükséges a hemolízis mintáinak megfigyelése és az optoquin és a bacitracin taxonjainak beillesztése, ami szükséges a diagnózishoz. Streptococcus pneumoniae és Streptococcus pyogenes illetőleg.

Másrészt, antibiotikumokkal kombinálva hasznos a klinikai jelentőségű fakultatív és szigorú anaerob mikroorganizmusok elkülönítése a vegyes növényzetből származó mintákból..

Végül a tripticasein szója agar összetétele és teljesítménye megfelel a különböző farmakopöák (európai, japán és észak-amerikai) által meghatározott követelményeknek..

index

• 1 Alapítvány
• 2 Előkészítés
  • 2.1 Tripticasein szója agar lemezek
  • 2.2. A vérrel kiegészített tripticasein szója agar lemezek
  • 2.3. A hármasvízből készült szója agar lemezek fűtött vérrel kiegészítve
  • 2.4 A tripticaseine szója agar ékei
• 3 Használat
• 4 Tömörített
• 5 Minőségellenőrzés
  • 5.1 Sterilitás szabályozás
  • 5.2 Növekedés-szabályozás
  • 5.3 A vérrel kiegészített tripticasein szója agar növekedésének és hemolízisének vizsgálata
• 6 Referenciák

alapítvány

A baktériumok megfelelő fejlődéséhez szükséges az energia-hozzájárulás, például aminosavak, vitaminok, purin bázisok és pirimidek jelenléte..

Ebben az értelemben a triptein és a szója-pepton ezeket a tápanyagokat mikroorganizmusoknak biztosítja, ezáltal lehetővé téve azok teljes fejlődését. Az igényes baktériumok esetében azonban szükséges, hogy kiegészítsük ezt az agart defibrinált vérrel vagy fűtött vérrel, hogy növeljék a gazdagodását.

Másrészt, ha antibiotikumot adunk a közeghez, akkor szelektív tápközegré válik. 0,6% élesztőkivonatot is hozzáadhat a Listeria nemzetség fajainak izolálásához, miközben cisztin-telluritot ad. és Bárányvér ideális Corynebacterium diphteriae.

Végül a nátrium-klorid az ozmotikus egyensúlyt adja meg a közegben, és az agar biztosítja a szilárd konzisztenciát.

előkészítés

Tripticasein szója agar lemezek

A tripticázin szója agar előállításához 40 gramm dehidratált kereskedelmi közeget kell mérni digitális skálán. Egy literben desztillált vízben oldódik.

Az elegyet 5 percig állni hagyjuk, majd hőforráshoz vezetjük a közeg feloldódásához. Gyakran keverjük, és 1 vagy 2 percig forraljuk. Ezt követően a közeget az autoklávban 121 ° C-on 15 percig sterilizáljuk.

Hagyjuk lehűlni 50 ° C-ra, és steril Petri-csészékbe helyezzük. Hagyja megszilárdulni, invertálni, megrendelni és hűtőszekrényben tárolni.

A közeg végső pH-ja 7,3 ± 0,2 legyen.

Figyelembe kell venni, hogy a dehidratált táptalaj színe világos bézs, és 10 és 35 ° C között, száraz helyen kell tárolni..

Az elkészített agar világos borostyán. Az elkészített lemezeket hűtőszekrényben (2–8 ° C) kell tárolni a felhasználásig.

A lemezek használat előtt el kell érniük a szobahőmérsékletet.

Tripticasein szója-agar lemezek, kiegészítve vérrel

A vér agart úgy állítjuk elő, hogy 5% -os defibrinált vért adunk hozzá a tripticasein-szója-agar 50 ° C-on történő hűtése idején. Az elegyet enyhe mozgásokkal homogenizáljuk.

Tálaljuk a steril petri-csészékben. A közeg színének cseresznye pirosnak kell lennie.

A tripticasein szója agar lemezek fűtött vérrel kiegészítve

A TSA-alapú vér-agar előállításához a fent leírt eljárások azonosak, de az autokláv elhagyásakor hagyjuk állni, amíg a közeg hőmérséklete megközelítőleg 56 és 70 ° C között van. Ekkor a vér elhelyezése és összekeverése addig, amíg a közeg barnare nem vált.

Tálaljuk steril petri-csészékben. A közeg színe csokoládébarna.

A tripticaseine szója agar ékei

Az agar előállítási eljárása megegyezik a lemezeknél leírtakkal, azzal a különbséggel, hogy a tápközeg Petri-csészékre történő kiszolgálása helyett a sterilizálás előtt 10 és 12 ml között oszlik meg a Bakelite fedelű csövekben..

Ezt követően a csöveket 121 ° C-on 15 percig autoklávozzuk. Elhagyáskor támaszkodva támaszkodnak, és hagyják, hogy megszilárduljanak.

Az előkészített ékeket felszínre vetik, és bizonyos nem igényes életképes mikroorganizmusokat tartanak fenn meghatározott ideig.

alkalmazások

A Trypticasein szója agart a következő esetekben használják:

-A legtöbb laboratóriumban rutinszerűen használt klasszikus vér agar elkészítéséhez.

-Az igényes baktériumok izolálása.

-A hemolízis mintájának megfigyelése.

-Diagnosztikai tesztek végrehajtása.

-Különleges vér agar előállítására alapul Corynebacterium diphteriae, tellurium cisztinnal és bárányvér.

-A bárányvér agar előkészítésének alapjaként több kanamicin-vankomicin az anaerobok növekedéséhez, különösen Bacteroides sp.

-Nem igényes törzsek karbantartásához (Bacterioteca).

-Mikrobiális aerob számítás a víz, a környezet, az élelmiszer- és kozmetikai minták mikrobiális határérték-vizsgálatában.

beültetett

A mintákat közvetlenül a vér vagy más adalékanyagokkal kiegészített triptázáz szója agar felületére lehet beoltani. A kimerüléssel vetik.

Míg a tripticasein szója-agar lemezek adalékanyag nélkül, általában mikrobiális törzsek (baktériumok vagy élesztő) szubkultúrá-sára használatosak.

Minőségellenőrzés

Sterilitás szabályozás

A tripticasein-szója-agarral készített különböző táptalajok sterilitásának ellenőrzéséhez ajánlatos a következőket tenni: minden egyes előkészített tételtől egy vagy két tányért vagy csövet be kell inkubálni 37 ° C-on 24 órán át, a sterilitás kimutatása céljából. Minden esetben növekedés nélkül kell maradnia.

Ha szennyezést talál, az egész tételt el kell dobni.

Növekedés-szabályozás

A trypticasein szója-agar megfelelő működésének vizsgálatához a következő baktériumtörzsek használhatók: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 és Enterococcus faecalis ATCC 29212.

A törzseket vetjük és aerobiosisban inkubáljuk 37 ° C-on 24 órán át.

A növekedésnek minden esetben kielégítőnek kell lennie.

A gombát a Complex-ként is használhatja Candida albicans ATCC 10231 és Aspergillus niger ATCC 16404. Mindkét törzs esetében jó növekedés várható.

A vérrel kiegészített tripticasein szója agar növekedési kontroll és hemolízis mintája

Az ezzel a bázissal készített vér-agar megfelelő működésének ellenőrzésére a következő törzsek használhatók: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 és Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

Őket vetjük és 37 ° C-on inkubáljuk microaerophilicusban 24 órán át.

A növekedésnek minden esetben kielégítőnek kell lennie, figyelembe véve ezt a 2007 - ben. \ T S. pyogenes béta-hemolízis (tiszta halo a kolónia körül) és mindkét törzsben S. pneumoniae az alfa-hemolízist (zöldes halo a telepek körül) meg kell figyelni.

referenciák

1. Wikipédia közreműködők. Trypticase I agar vagyok. Wikipédia, The Free Encyclopedia. 2018. december 17., 15:47 UTC. Elérhető: https://en.wikipedia.org
2. Laboratóriumok Britania. Trytein szója agar. 2015-ben elérhető: britanialab.com
3. Neogen Laboratories Szójabab triptika. Elérhető: foodsafety.neogen.com
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Argentínában. Panamericana S.A szerkesztő.
5. BD laboratóriumok Trypticase I Agar vagyok. 2014. Elérhető: .bd.com