Világos zöld agar alapozás, előkészítés és felhasználás



az világos zöld agar ez egy szilárd tenyésztőközeg, nagyfokú szelektivitással. Kizárólag a Salmonella nemzetség törzseinek izolálására használják, azonban vannak olyan kivételek, mint a typhi és a paratyphi fajok, amelyek nem nőnek ebben a közegben.

A Salmonella nemzetség keresése gyakori a széklet, a víz vagy az élelmiszer mintáiban. Ebben az értelemben ez a közeg nagyon hasznos lehet. Ezt az agart 1925-ben Kristensen, Lester és Jurgens hozta létre, később Kauffmann módosította.

Az állati szövet peptikus emésztéséből származó pluripeptonákból és a kazein hasnyálmirigy-emésztéséből áll, továbbá élesztőkivonatot, nátrium-kloridot, laktózt, szacharózt, fenolvörös, világos zöld és agar-agart tartalmaz..

Jellemzője, hogy a legtöbb baktérium számára nagyon kényelmetlen közeg, amely a Salmonella növekedését támogatja, de néhány kolibaktérium képes maradni benne, gyengén fejlődik.

Fontos kiemelni, hogy ebben a közegben a Shigella nemzetség nem nő és sem Salmonella typhimurium, vagy Salmonella paratyphi. Ezért, ha ezeket a mikroorganizmusokat kívánjuk izolálni, más eszközöket kell használni, például XLD agart..

index

  • 1 Alapítvány
    • 1.1 Világos zöld agar
    • 1.2 Fényes zöld agar (BGA) változatai
  • 2 Előkészítés
  • 3 Alkalmazások / alkalmazások
  • 4 Minőségellenőrzés
  • 5 Referenciák

alapítvány

Világos zöld agar

A közeget alkotó valamennyi komponensnek van egy speciális funkciója, amely meghatározza az agar tulajdonságait és tulajdonságait.

A pluripeptonák és az élesztő kivonata a tápanyagok forrása, ahonnan a mikroorganizmusok a fejlődésükhöz szükséges nitrogént és ásványi anyagokat vesznek fel. A laktóz és a szacharóz olyan mikroorganizmusok energiaforrása, amelyek képesek fermentálni őket.

A fényes zöld az a gátló anyag, amely megakadályozza a Gram-pozitív baktériumok és számos Gram-negatív mikroorganizmus kialakulását.

A nátrium-klorid az ozmotikus stabilitást biztosítja a közegben. Míg a fenolvörös a pH-mutató, a szénhidrátok erjedéséből származó savak észlelésekor a színt jelzi.

A laktóz és a szacharóz nem erjedő kolóniái ebben a fehér színű, rózsaszín vagy átlátszó táptalajban növekszik, piros alapon. Például a Salmonella nemzetségbe tartozó baktériumok.

Míg a laktóz-fermentáló baktériumok vagy szacharózok, amelyek ebben a táptalajban képesek növekedni, zöldes-sárga vagy zöldes-sárga telepeket fejlesztenek sárga-zöld alapon. Például, Escherichia coli és Klebsiella pneumoniae.

A világos zöld agar (BGA) változatai

Vannak más fényes zöld agarok is; novobiocin zöld agar fényes glükóz (NBG) és novobiocin agar világos zöld glicerin laktóz (NBGL).

Novobiocin agar világos zöld glükóz (NBG)

Trypticase szója-agart, vas-ammónium-citrátot, nátrium-tioszulfát-pentahidrátot, fenolvörös, glükóz, fényes zöld, novobiocint és desztillált vizet tartalmaz..

A szalmonella telepek székletmintákból történő izolálására szolgál.

Ebben az esetben az élénkzöld és a novobiocin a gram-pozitív baktériumok és néhány Gram-negatív mikroorganizmus növekedését gátló anyagok..

A nátrium-tioszulfát a kén forrása, a vas-vas-citrát pedig a vas forrása, mindkettő szükséges ahhoz, hogy a vas-szulfid fekete csapadék képződésével feltárja a hidrogén-szulfid termelését..

A glükóz a fermentálható szénhidrát és a fenolvörös a pH indikátor.

Ebben a táptalajban a Salmonella telepek nagyméretűek, vöröses halóval körülvett fekete központtal, amelyet egy tiszta, látható terület követ. Néhány törzs Citrobacter freundii a salmonellával azonos kolóniákat termelnek.

Világos zöld novobiocin agar glicerin-laktóz (NBGL)

Ez a táptalaj triptáz-szója-agart, vas-ammónium-citrátot, nátrium-tioszulfátot, laktózt, glicerint, élénkzöldet, novobiocint és desztillált vizet tartalmaz..

Ennek a közegnek az előzővel való különbsége az, hogy a glükózt laktózzal helyettesítik, és a glicerint és a fenol vöröset nem használják.

A tápközeget a Salmonella fajok izolálására is használják, a telepek feketék, a hidrogén-szulfid előállításával.

Csak olyan kolóniák állnak elő, amelyek nem termelnek savat glicerinből vagy laktózból2Elég, mert az alacsony pH zavarja a H képződését2S. Ez a legtöbb Proteus és Citrobacter faj esetében színtelen telepeket eredményez.

előkészítés

-Mérjünk be 58 g-ot a kereskedelemben kapott dehidratált közegből. Adjunk hozzá egy liter dupla desztillált vízben. Keverjük össze, hagyjuk állni néhány percig, és a készítményt hőforrásba helyezzük, amíg teljesen fel nem oldódik.

-Az autokláv 121 ° C-on 15 percig nem haladja meg a sterilizálási időt.

-Hagyja állni, és steril petri-csészékben még forró legyen. A végső pH-érték 6,9 ± 0,2 legyen.

-Hagyja megszilárdulni és hűtőszekrényben tárolni a használatig. Az ültetés előtt a lemezeket szobahőmérsékletre kell helyezni.

-A por közeg zöld és készen áll a narancssárga-barna vagy vöröses-zöld színre, a pH-tól és a kereskedelmi háztól függően. Egy nagyon barna szín jelzi, hogy az agar túlmelegedett.

-Miután az agar megszilárdult, nem ajánlott az átdolgozás, mivel a közeg romlik.

Alkalmazások / alkalmazások

Ezt a közeget használják a Salmonella nemzetség törzseinek székletmintákból és tejtermékekből történő keresésére..

Mivel ez egy viszonylag kényelmetlen környezet, célszerű a bőséges inokulumot ültetni, ha a közvetlen mintát használják. Ellenkező esetben a minták előzetes dúsítását és dúsítását az e közegbe való telepítés előtt kell elvégezni.

Mivel egyes Salmonella törzsek gátlása vagy növekedése nehézségekbe ütközik, ajánlatos a tápközeget más szelektív agarokkal kísérni a Salmonella kezelésére..

Minden jellegzetes Salmonella-kolóniát biokémiai vizsgálatnak kell alávetni a végleges azonosítás érdekében.

Minőségellenőrzés

A fényes zöld agar közeg jó működésének teszteléséhez az ATCC törzsek felhasználhatók ugyanezen fejlődésének megfigyelésére..

A minőségellenőrzéshez használt leggyakoribb törzsek a következők: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

Az első 3-asnak rózsaszín vagy átlátszó fehér telepeket kell adnia piros alapon. A jó fejlettségű Salmonella és a Proteus ritka vagy rendszeres növekedéssel.

A Klebsiella és az Escherichia várhatóan sárgás-sárga, sárga háttérrel rendelkező telepek, Shigella és Staphylococcus esetében pedig gátolni kell.

A dehidratált közeget szobahőmérsékleten, száraz helyen kell tárolni, mert a közeg nagyon higroszkópos.

referenciák

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratórium S.A. Ragyogó zöld agar. 2009
  2. Brit Laboratórium Világos zöld agar. 2015.
  3. BD laboratórium. BD Brilliant Green Agar. 2013.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiológiai diagnózis. (5. kiadás). Argentína, szerkesztő Panamericana S.A..
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Argentínában. Panamericana S.A szerkesztő