Biokémiai vizsgálatok típusai, milyenek és fontosak

az biokémiai vizsgálatok a mikrobiológiában azok a kémiai tesztek halmaza, amelyeket a mintában lévő mikroorganizmusokon végeznek annak érdekében, hogy azokat azonosítsák; Ezek a mikroorganizmusok általában baktériumok. A mikrobiológus számára számos biokémiai vizsgálat áll rendelkezésre.

Ezeknek a teszteknek a megválasztása azonban az előzetes megállapításokon alapul, mint például a Gram-folt minta és a növekedési karakterek, amelyek lehetővé teszik a baktériumok egy adott kategóriába való hozzárendelését. A biokémiai vizsgálatok főként az egyes baktériumok metabolikus tulajdonságain alapulnak. 

Nem minden baktérium rendelkezik ugyanazokkal a tulajdonságokkal, ezért azt vizsgáljuk, hogy vannak-e bizonyos enzimek a szubsztrát hozzáadásával és várakozással a reakció bekövetkeztére. Általában ez a meghatározás a tápközeg színének vagy pH-értékének változásával történik.

Kevesebb, mint 15 biokémiai vizsgálatra van szükség a baktérium megbízható azonosításához a fajok szintjéig. Több biokémiai vizsgálat elvégzése növelheti az azonosítás iránti bizalmat.

A biokémiai vizsgálatok többségét szérumban vagy vérplazmában végezzük. Ezek azonban más biológiai szekréciókban is elvégezhetők, mint például vizelet, cerebrospinális folyadék, pleurális folyadék és széklet..

index

• 1 Osztályozás
  • 1.1 Univerzális
  • 1.2
  • 1.3
• 2 A biokémiai vizsgálatok típusai
  • 2.1 A kataláz teszt
  • 2.2 Az oxidáz teszt
  • 2.3 Sós mannit-agar (MSA) vizsgálata
  • 2.4 Koaguláz teszt
  • 2.5 Az ureazteszt
• 3 Melyek a biokémiai vizsgálatok??
• 4 Fontosság
• 5 Referenciák

besorolás

A biokémiai vizsgálatok három csoportba sorolhatók:

egyetemes

Ezeket a vizsgálatokat elvégezhetjük bármelyik mintán, és a mikrobiológust a következő biokémiai vizsgálatokkal lehet irányítani, amelyeket a megbízható azonosítás érdekében kell elvégezni..

példa

A kataláz és az oxidáz teszt.

differenciálművek

Ezek azok a tesztek, amelyeket a mintában lévő mikroorganizmusok azonosítására a faji szintig végeznek.

Az azonosítás a tesztek kombinációjának eredményei alapján történik, mivel az egyedi eredmények nem eléggé informatívak az azonosításhoz.

példa

IMViC tesztek és cukorfelhasználási tesztek.

fajlagos

Ezek a fajok meghatározott csoportjának specifikus tesztjei, vagy a fajok altípusa. Ezeket a teszteket általában az alfajok szintjének megerősítésére vagy azonosítására végzik. Az egyes tesztek önmagukban informatívak.

példa

A y-glutamil-aminopeptidáz teszt.

A biokémiai vizsgálatok típusai

A kataláz teszt

A kataláz teszt a kataláz enzim jelenlétének kimutatására szolgáló teszt, amely a hidrogén-peroxidot oxigénbe és vízbe bontja. Kis mennyiségű baktériumot adunk egy csepp hidrogén-peroxidhoz (3%) a lemezen.

A kataláz teszt egy egyszerű teszt, amelyet a mikrobiológusok használnak a baktériumfajok azonosításához és a mikrobák azon képességének meghatározásához, hogy a kataláz enzimet előállítsák a hidrogén-peroxid lebontására..

Ha oxigénbuborékok figyelhetők meg, azt jelenti, hogy a baktérium rendelkezik a kataláz enzimmel, mert katalizálja a hidrogén-peroxid oxigén és víz lebomlását. Azt mondják, hogy a szervezet kataláz pozitív (például: Staphylococcus aureus).

Az oxidáz teszt

Ez a teszt a citokróm oxidáz enzimet (az elektronszállító láncban fontos) tartalmazó mikroorganizmusok azonosítására szolgál. Gyakran használják, hogy megkülönböztessék az Enterobacteriaceae és a Pseudomadaceae családokat.

A citokróm-oxidáz az elektronátviteli láncból az elektronokat oxigénbe (a végső elektron-akceptorba) továbbítja, és vízre csökkenti. Az oxidáz tesztek mesterséges elektron donor és akceptor molekulákat biztosítanak.

Amikor az elektrondonort a citokróm oxidáz hatásával oxidálják, a közeg sötétlila lesz és pozitív eredménynek tekinthető. A mikroorganizmus Pseudomonas aeruginosa példa a pozitív oxidáz baktériumra.

Sós mannit-agar teszt (MSA)

Ez a fajta vizsgálat szelektív és differenciált. Az MSA kiválasztja azokat a szervezeteket, amelyek képesek nagy koncentrációjú sókban élő környezetben élni, mint pl Staphylococcus ellentétben a. \ t Streptococcus, amelynek növekedése ezekben a körülmények között gátolt.

Ebben a vizsgálatban a differenciál komponens cukor-mannit. A mannitot élelmiszerforrásként használó szervezetek olyan fermentációs melléktermékeket termelnek, amelyek savasak, és így csökkentik a közeg pH-ját..

A tápközeg savassága a pH-jelzőt, fenolvörössé válik, sárga színűvé válik. Az ilyen módszerrel differenciálható baktériumfajok példái a következők: Staphylococcus aureus (pozitív, mert mannitot hordoz) és Staphylococcus epidermidis (negatív, mert a mannit nem erjed).

Koaguláz teszt

A koaguláz olyan enzim, amely segít a vérplazma koagulálásában. Ezt a vizsgálatot pozitív gram-pozitív és kataláz-pozitív baktériumokon végeztük Staphylococcus aureus (pozitív koaguláz) Valójában a koaguláz ez a baktériumfaj virulencia faktorja.

A baktérium okozta fertőzés kialakulása valószínűleg megvédi a fagocitózistól. Ez a teszt nagyon hasznos, ha különbséget kíván tenni Staphylococcus aureus más fajokból Staphylococcus amelyek negatív koaguláz.

Az ureazteszt

Ezt a vizsgálatot a karbamid hidrolizálására képes baktériumok azonosítására használják, az ureazt használva. Általában a nemek megkülönböztetésére használják Proteus más bélbaktériumok.

A karbamid hidrolízise egyik terméke ammóniát termel. Ez a gyenge bázis megnöveli a 8,4-nél nagyobb közeg pH-ját, és a pH-jelző (fenolvörös) sárgáról rózsaszínre változik. Egy pozitív ureaz baktérium egy példája Proteus mirabilis.

Melyek a biokémiai vizsgálatok??

A mikrobiológiában végzett biokémiai vizsgálatokat mikrobák által okozott betegségek diagnosztizálására és az ezek elleni küzdelemben alkalmazott kezelések monitorozására használják. Emellett fertőző betegségek szűrésére és prognózisukra is felhasználhatók..

A mikroorganizmusok biokémiai azonosítása ötletet ad arra, hogy ezek a mikroorganizmusok képesek legyenek, ugyanakkor lehetséges, hogy ugyanazon faj különböző törzseit megkülönböztessék specifikus biokémiai profilokkal.

A specifikus enzimaktivitások különbségei tájékoztatják a mikroorganizmus ökológiáját, fiziológiáját vagy természetes élőhelyét, amely egyes esetekben fontos információnak tekinthető.

fontosság

A baktériumok alakjának, méretének és elhelyezésének strukturális különbségei nagyon kevéssé segítik az azonosítási folyamatot, mivel sok olyan baktériumfaj van, amelyeknek hasonló alakja, mérete és elhelyezése van..

Emiatt végül a baktériumok azonosítása elsősorban a biokémiai aktivitásuk különbségén alapul.

Minden baktériumfajnak megvan a jól meghatározott metabolikus aktivitása, amely minden más fajtól eltér. Ezek a biokémiai "ujjlenyomatok" a bakteriális enzimek által vezérelt tulajdonságok.

A biokémiai vizsgálatok ezért fontosak, mert segítik a kutatót a mintában jelenlévő kórokozók helyes azonosításában, és így képesek a betegnek megfelelő kezelést ajánlani..

referenciák

1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Klinikai biokémia (8. kiadás). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P. H. és Cowan, S. T. (1952). A bakteriológia biokémiai módszerei. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Klinikai biokémia (5. kiadás). Elsevier Egészségtudományok.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). A mikrobiológiai gyakorlati kézikönyv (2. kiadás). CRC Nyomja meg.
5. Harrigan, W. (1998). Laboratóriumi módszerek az élelmiszer mikrobiológiában (3. kiadás). Academic Press.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Gyakorlati mikrobiológia. BI Kiadványok Pvt Ltd.