Negatív festési alap, technika, előnyök és hátrányok

az negatív festés Ez egy speciális színező módszer a kapszula jelenlétének kiemelésére egyes mikroorganizmusokban - főként Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae és Cryptococcus neoformans-, klinikai mintákból vagy tiszta tenyészetekből.

A negatív festéshez általában használt közvetlen minta a cerebrospinális folyadék. Ez a technika gyors alternatívát jelent a meningitis feltételezett diagnózisára, különösen Cryptococcus neoformans.

Hasonlóképpen, ezt a foltot alkalmazhatjuk a köpetre és a steril folyadékokra általában, valamint a fiatal, tiszta tenyészetekből nyert törzsekre. Ez a technika nigrosin vagy kínai tintát használ a végrehajtásához; ezért nagyon egyszerű és gazdaságos módszertan alkalmazandó, amely rövid időn belül nagy diagnosztikai értékkel bír.

Ebben az értelemben bármely laboratórium képes elvégezni ezt a színezést. Természetesen a laboratóriumnak rendelkeznie kell egy kompetens személyzettel, amely képes felismerni a rizs élesztőit Cryptococcus neoformans elkülönített vagy rögtönzött, és megkülönböztetik őket a mintában előforduló leukocitáktól és tárgyaktól.

index

• 1 Alapítvány
• 2 Technika
  • 2.1 Anyagok
  • 2.2 A mintavételre vonatkozó előírások
  • 2.3 A technika végrehajtása közvetlen mintákkal
  • 2.4 A technika végrehajtása tenyészetekből származó törzsekkel
  • 2.5 Megfigyelés mikroszkópban
• 3 Előnyök
• 4 Hátrány
• 5 Szövet festés indiai tintával
• 6 Referenciák

alapítvány

A Nigrosin és az indiai tinta hasonló módon jár el; ezért a két anyag egyikét felcserélhető módon lehet használni.

Ezt a technikát negatív festésnek nevezik, mert ellentétes a színező technikák többi részével. Ebben a tekintetben a megmaradatlan marad a keresendő vagy látni kívánt szerkezet; azaz a mikroorganizmusok.

Ezért a színezés alapja a kenet alsó részének sötét színű festése. Ebben a forgatókönyvben a zárt struktúrák világos vagy színtelen színnel kerülnek kiemelésre.

Általában az élesztőket visszamaradónak tekintik, amelyet a kapszulának megfelelő tiszta halo vesz körül. Ez azért van, mert a kínai tinta és a nigrosin olyan anyagok, amelyek nem képesek bejutni az élő mikroorganizmusok kapszuláját képező poliszacharidba.

Érdemes megjegyezni, hogy más struktúrák, amelyek a közvetlen mintában jelen lehetnek, mint például a leukociták vagy a vörösvértestek, nem hatolnak be.

Most, ha a mikroorganizmusok elpusztultak, a tinktúra behatolhat rájuk, oly módon, hogy ez a festés is hasznos a mikroorganizmusok életképességének értékelésére..

technika

anyagok

Nigrosine

A nigrosine nevét a fekete színének köszönheti. Ez egy szintetikus anyag, amelyet a szerves vegyületek - például nitro-benzin, anilin és anilin-hidroklorid - keverékének melegítésével kapunk katalizátor (vas vagy réz) alkalmazásával a reakcióban..

Kínai tinta

A kínai tinta egy olyan anyag, amelyet elsősorban az ázsiaiok írnak, művészeti alkotásokat készítenek és monokróm festményeket készítenek. Nagyon népszerű a kínai kultúrában.

A tintahal festékéből nyert, porított szénnel keverve, kis gyantás fák égési terméke.

Lehetőség van arra is, hogy a szénhidrogének (növényi olajok) égetéséből származó koromból, valamint egy fehérje-zselatinból állítsuk elő, amely megfelelő konzisztenciát biztosít a szénrészecskék kicsapódásának megelőzésére.

A mintavételre vonatkozó előírások

- Nem igényel böjtölést.

- A CSF, a köpet vagy a steril folyadék mintájának legalább 1 ml-t kell tartalmaznia, és a laboratóriumban azonnal szobahőmérsékletre kell vinni.

- A CSF-et és steril folyékony mintákat szakosodott orvosnak kell bevennie.

- A fent említett kórokozókhoz kapcsolódó gyanús törzs tiszta tenyészete is lehet.

A technika végrehajtása közvetlen mintákkal

- A mintákat centrifugálni kell, majd a felülúszót el kell dobni, és az üledéket meg kell venni.

- Egy centrifugált anyag (üledék) cseppje és egy csepp kínai tinta vagy nigrosin kerül a tiszta lemezre..

- A keveréket jól össze kell keverni, és fedőlappal kell fedni, amely lehetővé teszi, hogy a csepp egy vékony fóliának szétterüljön anélkül, hogy a széleket meghaladná.

- Ezt követően a készítményt a mikroszkópba helyezzük.

- Ha a készítmény túl sötét, vízzel hígítható.

A technika végrehajtása tenyészetekből származó törzsekkel

- Egy fiatal növény nagyon kis részét vető tűvel veszik fel, és egy csepp kínai tintában oldottuk fel, amelyet korábban egy tiszta tárgylemezre helyeztek.

- A fedőlap tetejére kerül.

- A mikroszkópban 10X-en, majd 40X-on megfigyelhető.

A kolónia egy részét desztillált vízben is feloldhatja, és onnan egy csepp és keverje össze a tintával. Ily módon a készítmény nem lesz olyan vastag, ami lehetővé teszi a szerkezetek elkülönített megfigyelését; Ha agglomerációk vannak, nem fogják jól megfigyelni.

Egy másik módszer a következő:

- Helyezzünk egy csepp tenyészetet szuszpenzióba a csúszka egyik végén.

- Helyezzünk egy csepp nigrosint ugyanarra a végre és keverjük össze.

- Egy másik dia segítségével bontsa ki a mintát úgy, mintha hematológiai kenetet csinált volna.

- Hagyja száradni és figyelni a mikroszkóp alatt.

Megfigyelés mikroszkópban

Először 10X-es céllal kell összpontosítanunk, hogy széles körű képet kapjunk a mezőről. Ezt követően meg kell keresni, ha vannak világos terek; ha vannak, fókuszálj a 40X-el a részletek megtekintéséhez.

haszon

- Könnyen kivitelezhető.

- Ez egy gazdasági technika.

- Ez a módszer nem követeli meg, hogy a kenetet hőre vagy vegyszerekre rögzítsék; ezért a mikroorganizmusokat torzítás nélkül figyelték meg.

- A friss készítményt nem kell szárítani, így azonnal észrevehető, gyors eredményt hozva.

hátrány

Az összeszerelés után azonnal meg kell figyelni a friss készítményeket; Ha megengedik, hogy megszáradjanak, már nem lehet őket megfigyelni és egy új.

Szövet festés indiai tintával

Egy másik funkció, amit a kínai tinta teljesíthet, a patológiai laboratóriumokban van. Ezt a sebészeti úton eltávolított szövetmintákra alkalmazzuk, hogy jelezzük a tumor reszekció margóit.

A jelzett szövetet ecetsavval permetezzük. Ez káros hatású, és megakadályozza, hogy a tinta kiszabaduljon, amikor a szövetet a biopsziás készítmények rutinszerű feldolgozásának vetik alá..

Az eljárás abból áll, hogy a szövetet alkoholban és xilolban fürdjük, majd paraffinviaszba töltjük. Ez a jelölés vezeti a patológust a szövet megfigyelésénél, jelezve, hogy hol van a sebészeti rezekció vagy más érdekes pont.

referenciák

1. "Nigrosine". Wikipédia, A szabad enciklopédia. 2017. július 11., 22:46 UTC. 2019. január 6., 16:56: en.wikipedia.org
2. "Kínai tinta". Wikipédia, A szabad enciklopédia. Október 1, 2018, 03:08 UTC. 2019. január 6., 18:20: en.wikipedia.org/
3. Silva L, Silva C, Fernández N, Bueno C, Torres J, Rico M, Macías J és munkatársak. (2006). Az Extremadura autonóm közösség munkatársai. Különleges napirend IV. Szerkesztői MAD. Sevilla-Spanyolország, 211-212. Oldal.
4. Silva M, García M, Corrales J, Ponce E. (2006), laboratóriumi szakember, a galíciai egészségügyi szolgálat (SERGAS). Tárgyspecifikus kötet 2. Szerkesztői MAD. Sevilla-Spanyolország, 79-80. Oldal.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott mikrobiológiai diagnózisa. 12 ed. Argentínában. Panamericana S.A szerkesztő